大鼠鼓膜上皮干细胞 新品

产品定义：

大鼠鼓膜上皮干细胞是存在于大鼠鼓膜上皮层中的成体干细胞，具有自我更新和分化能力。它可分化为鼓膜的扁平上皮细胞和立方上皮细胞，维持鼓膜上皮的正常结构和功能，在鼓膜损伤后可增殖分化参与鼓膜的修复过程，是研究鼓膜再生机制及鼓膜损伤修复的重要细胞模型。

产品简介：

细胞详述

鼓膜也称耳膜，为一弹性灰白色半透明薄膜，将外耳道与中耳隔开。鼓膜穿孔不能yu合，可能与干细胞受损或增殖抑制有关。鼓膜上皮干细胞的分布与鼓膜的血供丰富的区域一致。

鼓膜上皮干细胞高表达 β1整合素，有很强的黏附型，对Ⅳ型胶原的黏附鼻其他细胞更快、更强。

细胞特性

1)组织来源于实验动物的正常鼓膜组织。

2)细胞鉴定：广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：铺路石状细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

我们推荐使用 Delf原代 上皮 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
原代细胞培养：

培养基选择：根据细胞类型选择专用培养基，如上皮细胞用上皮细胞培养基、成纤维细胞用成纤维细胞培养基，必要时添加血清（胎牛血清FBS常用，浓度10%-20%）、生长因子、抗生素等补充成分；培养基使用前需预热至37℃。

接种密度控制：原代细胞接种密度不宜过低，否则细胞难以分泌足够的自分泌因子支持生长，一般接种密度为1×10⁵-5×10⁵细胞/cm²；接种后轻轻晃动培养瓶，使细胞均匀分布。

培养环境监控：保持培养箱内37℃、5%CO₂的恒定环境，定期检查培养基颜色变化（变黄说明pH下降，需及时换液）；原代细胞贴壁前避免频繁晃动培养瓶，贴壁后通常每2-3天换液一次。
原代细胞分离：

组织样本处理：取材后立即置于预冷的含抗生素的PBS或组织保存液中，避免样本干燥和温度变化；修剪时去除坏死、结缔组织等杂质，尽量减小组织块体积以提高消化效率。

消化方法选择：

酶消化法：根据组织类型选对应酶（如胰蛋白酶用于上皮类组织、胶原酶用于结缔组织丰富的组织），严格控制消化温度（通常37℃）和时间，每隔5-10分钟镜下观察，避免过度消化损伤细胞。

机械分离法：适合柔软组织（如脑、肝脏），通过剪碎、吹打、过滤等方式分散细胞，操作时动作轻柔，减少细胞机械损伤。

细胞过滤与离心：用合适孔径的细胞筛（如100-200目）过滤细胞悬液，去除未消化的组织块；离心转速通常为1000-1500rpm，时间5-10分钟，避免高速离心导致细胞破裂。

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