大鼠骨髓肥大细胞

产品定义：

大鼠骨髓肥大细胞是起源于大鼠骨髓造血干细胞的一种免疫细胞，成熟后主要定居于外周组织，也可存在于骨髓中。它富含颗粒，含有组胺、肝素等生物活性物质，在过敏反应中可被激活释放颗粒内容物，引起血管扩张、通透性增加等过敏症状，同时也参与炎症反应、组织修复及免疫调节过程。

产品简介：

细胞详述

肥大细胞（ Mast cell, MC）是和血液的嗜碱粒细胞一样，具有强嗜碱粒颗粒的组织细胞，细胞核小，位于细胞中央。

MC分泌多种细胞因子，参与调节。此外，还表达MHC分子，B7分子。有研究表明，MC在超敏反应如支气管xiao喘的致病方面起着重要作用，在自身ji病如多发性硬化、类风湿关节炎中起作用。

细胞特性

1) 组织来源于实验动物的正常骨髓组织。

2) 细胞鉴定：CD117免疫荧光染色为阳性。

3) 经鉴定细胞纯度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5) 细胞生长方式：圆形或卵圆形细胞，悬浮培养。

推荐培养基：

我们推荐使用 Delf原代 肥大 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞培养方法：

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
原代细胞实验常见问题：

污染防控：实验全程严格无菌操作，超净工作台使用前紫外消毒30分钟，实验用品需高压灭菌；定期对培养箱、水浴锅等设备进行清洁和消毒，避免细菌、真菌、支原体污染。

细胞老化与分化：原代细胞传代次数有限，通常传至3-5代后会出现老化，需及时冻存早期代次细胞；培养过程中避免过度传代、营养缺乏、环境刺激等因素，防止细胞自发分化。

实验重复性保障：每次实验使用同一来源、同一代次的细胞，严格控制实验条件（如培养基批次、消化时间、培养时间等），设置足够的重复样本，减少实验误差。

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