猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病型(HP-PRRSV)RNA核酸检测试剂盒（恒温荧光法） 新品

产品介绍：

该试剂盒专门用于快速检测和区分高致病性毒株，适用于猪场、基层兽医站等场景的现场快速筛查。

与传统的荧光定量PCR法相比，恒温荧光法（通常基于RT-LAMP或RT-RAA原理）无需复杂的热循环设备，具有操作简便、速度快的特点。

�� 产品核心信息

检测对象：猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病型（Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus, HP-PRRSV）。该病毒是动脉炎病毒科的一员，可引起猪蓝耳病，导致母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病。

检测原理：逆转录-恒温荧光扩增技术（通常为RT-LAMP或RT-RAA）。由于PRRSV是RNA病毒，该技术首先将病毒RNA逆转录为cDNA，然后在恒定温度（通常为60-65℃）下进行核酸扩增，并通过荧光染料实时监测扩增过程。试剂盒设计的引物通常靶向高致病性毒株的特征性基因区域（如Nsp2基因的特征性缺失片段）。

灵敏度与特异性：

高灵敏度：最低检测限通常可达 1×10³ copies/mL。

高特异性：特异性≥99%，能够特异性地检测高致病性毒株，不会与经典PRRSV毒株或其他猪源病原（如猪瘟病毒、圆环病毒等）发生交叉反应。

适用样本：猪的血清、血浆、全血、肺组织、淋巴结、扁桃体或精液等。

适用仪器：恒温荧光检测仪（如Genie II、YR-820等专用设备）或具有恒温扩增功能的荧光定量PCR仪。

�� 产品组成与规格

组分名称  规格示例  说明

反应液A (Reagent A)  1100 μL (管)  含引物混合物、缓冲液、dNTPs等核心成分。

反应液B (Enzyme B)  50 μL (管)  含逆转录酶、Bst DNA聚合酶（LAMP）或重组酶混合物（RAA），需-20℃保存。

阳性对照 (Positive Control)  100 μL (管)  含HP-PRRSV目标基因片段的质粒或体外转录RNA。

阴性对照 (Negative Control)  100 μL (管)  无菌双蒸水或缓冲液。

C-I (荧光增强液)  1000 μL (管)  部分产品包含，用于增强荧光信号。

�� 操作流程简述

样本采集与处理：

血液样本：采集抗凝血（EDTA抗凝）或血清。

组织样本：取肺、淋巴结或扁桃体，加入生理盐水研磨制成10%匀浆，离心取上清。

RNA提取：

使用商用病毒RNA提取试剂盒（柱提法/磁珠法）提取样本中的总RNA。

关键点：操作过程要防止RNA降解，提取的RNA应尽量无蛋白、酚等抑制物。

试剂准备与加样：

将反应液和酶液在冰上解冻并充分混匀，离心30秒。

按说明书比例配制反应体系（通常为25-50 μL），向反应管中加入提取的RNA模板（通常2-5 μL）。

必须设置：阴性对照（无菌水）和阳性对照（试剂盒提供）。

恒温扩增：

将反应管放入恒温荧光检测仪中。

推荐程序：

反应温度：63℃（具体以说明书为准，RT-RAA法可能为42℃）；

反应时间：30-60分钟。

结果判读：

阳性（+）：反应管内出现典型的“S”型扩增曲线，且仪器自动判定为阳性。

阴性（-）：无扩增曲线，或仪器判定为阴性。

质控要求：阳性对照应出现明显的扩增曲线，阴性对照应无扩增曲线。

⚠️ 注意事项与安全提示

严格分区操作：为防止气溶胶污染导致假阳性，实验必须严格分区（试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区），且各区物品专用。

试剂保存：试剂盒需在 -20℃ 条件下避光保存。酶混合物对温度敏感，应避免反复冻融。

临床意义：高致病性PRRSV致死率极高，且传播迅速。早期快速检测有助于及时隔离病猪、净化猪群，防止疫情扩散。

区分经典株：本试剂盒专门针对高致病性毒株设计，在检测时不会扩增经典毒株。若需全面了解感染情况，建议配合使用通用型PRRSV检测试剂盒。

废弃物处理：反应结束后，严禁开盖，以免扩增产物（含荧光染料和DNA）污染环境。应将反应管密封后作为生物废弃物处理。

公司正在出售的产品：

PCR（聚合酶链式反应）是一种基因扩增技术，

用于检测或定量特定DNA/RNA序列。其核心是通过温度循环（变性、退火、延伸）扩增目标基因片段，而非培养生物体。

关键点：

无需培养：PCR直接检测样本中的核酸，无需预先培养微生物或细胞。

应用场景：病原体检测（如病毒、细菌）、基因表达分析、遗传病诊断等。