猪流行性腹泻病毒(PEDV)RNA核酸检测试剂盒（恒温荧光法） 新品

产品介绍：

产品核心信息

检测对象：猪流行性腹泻病毒（Porcine Epidemic Diarrhea Virus, PEDV），一种引起仔猪严重腹泻和高死亡率的冠状病毒。

检测原理：逆转录-恒温荧光扩增技术（通常为RT-LAMP或RT-RAA）。由于PEDV是RNA病毒，该技术首先将病毒RNA逆转录为cDNA，然后在恒定温度（通常为60-65℃）下进行核酸扩增，并通过荧光染料实时监测扩增过程。

 灵敏度与特异性：

高灵敏度：最低检测限通常可达 1×10³ copies/mL（部分产品可达100拷贝/mL）。

高特异性：特异性≥99%，不会与其他猪源病原（如猪传染性胃肠炎病毒TGEV、猪δ冠状病毒PDCoV等）发生交叉反应。

适用样本：猪的粪便、肠内容物、呕吐物或肠道组织匀浆液。

适用仪器：恒温荧光检测仪（如Genie II、YR-820等专用设备）或具有恒温扩增功能的荧光定量PCR仪。

�� 产品组成与规格

组分名称  规格示例  说明

反应液A (Reagent A)  1100 μL (管)  含引物混合物、缓冲液、dNTPs等核心成分。

反应液B (Enzyme B)  50 μL (管)  含逆转录酶、Bst DNA聚合酶（LAMP）或重组酶混合物（RAA），需-20℃保存。

阳性对照 (Positive Control)  100 μL (管)  含PEDV目标基因片段的质粒或体外转录RNA。

阴性对照 (Negative Control)  100 μL (管)  无菌双蒸水或缓冲液。

C-I (荧光增强液)  1000 μL (管)  部分产品包含，用于增强荧光信号。

�� 操作流程简述

样本采集与处理：

粪便/肠内容物：取新鲜样本，加入生理盐水制成10%匀浆，离心取上清。

组织样本：取小肠、肠系膜淋巴结等组织，研磨制成10%匀浆，离心取上清。

RNA提取：

使用商用病毒RNA提取试剂盒（柱提法/磁珠法）提取样本中的总RNA。

关键点：操作过程要防止RNA降解。

试剂准备与加样：

将反应液和酶液在冰上解冻并充分混匀，离心30秒。

按说明书比例配制反应体系（通常为25-50 μL），向反应管中加入提取的RNA模板（通常2-5 μL）。

必须设置：阴性对照（无菌水）和阳性对照（试剂盒提供）。

恒温扩增：

将反应管放入恒温荧光检测仪中。

推荐程序：

反应温度：63℃（具体以说明书为准，RAA法可能为42℃）；

反应时间：30-60分钟。

结果判读：

阳性（+）：反应管内出现典型的“S”型扩增曲线，且仪器自动判定为阳性。

阴性（-）：无扩增曲线，或仪器判定为阴性。

质控要求：阳性对照应出现明显的扩增曲线，阴性对照应无扩增曲线。

⚠️ 注意事项与安全提示

严格分区操作：为防止气溶胶污染导致假阳性，实验必须严格分区（试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区），且各区物品专用。

试剂保存：试剂盒需在 -20℃ 条件下避光保存。酶混合物对温度敏感，应避免反复冻融。

临床意义：PEDV对仔猪致死率极高，且传播迅速。早期快速检测有助于及时隔离病猪、消毒环境，防止疫情扩散。

废弃物处理：反应结束后，严禁开盖，以免扩增产物（含荧光染料和DNA）污染环境。应将反应管密封后作为生物废弃物处理。

�� 补充说明

RT-RAA技术：逆转录-重组酶介导的等温扩增（RT-RAA）是另一种常见的恒温技术，反应温度通常为37-42℃，反应时间仅需20-30分钟，非常适合现场快速检测。

多重检测：市面上也有将PEDV与TGEV（猪传染性胃肠炎病毒）、PDCoV（猪δ冠状病毒）合并检测的三重恒温荧光检测试剂盒，可一次性鉴别三种主要的猪腹泻冠状病毒。

公司正在出售的产品：

PCR（聚合酶链式反应）是一种基因扩增技术，

用于检测或定量特定DNA/RNA序列。其核心是通过温度循环（变性、退火、延伸）扩增目标基因片段，而非培养生物体。

关键点：

无需培养：PCR直接检测样本中的核酸，无需预先培养微生物或细胞。

应用场景：病原体检测（如病毒、细菌）、基因表达分析、遗传病诊断等。