对虾血细胞虹彩病毒（SHIV）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 新品

产品介绍：

这是一份关于对虾血细胞虹彩病毒（SHIV）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）的详细介绍。该试剂盒主要用于对虾养殖业中虹彩病毒病的早期诊断与监测，基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，能够实现高灵敏度和高特异性的检测。

 �� 产品核心信息

检测对象：对虾血细胞虹彩病毒（Shrimp Hemocyte Iridescent Virus, SHIV），现被国际病毒分类委员会（ICTV）统一命名为十足目虹彩病毒1型（Decapod Iridescent Virus 1, DIV1）。

检测原理：实时荧光定量PCR法（qPCR），采用TaqMan荧光探针技术。试剂盒利用特异性引物和探针靶向DIV1的保守基因片段（如主要衣壳蛋白基因MCP）进行扩增。

灵敏度与特异性：

高灵敏度：最低检测限通常可达 10³ copies/mL（部分产品可达10拷贝/μL），能有效检出低病毒载量的样本。

高特异性：特异性≥99%，不会与其他常见的虾类病毒（如WSSV、IHHNV、EHP等）发生交叉反应。

适用仪器：适用于主流的荧光定量PCR仪，如ABI 7500、LightCycler系列等。

�� 产品组成与规格

组分名称  规格示例  说明

qPCR反应液 (2×Premix)  预混了dNTPs、缓冲液、Mg²⁺等核心成分。  部分产品将引物探针预混在内，部分为单独分装。

酶混合物 (Enzyme Mix)  含Taq DNA聚合酶，需-20℃保存。  对温度敏感，避免反复冻融。

阳性对照 (Positive Control)  含DIV1目标基因片段的质粒DNA。  用于验证试剂有效性及制作标准曲线。

阴性对照 (Negative Control)  无菌双蒸水或缓冲液。  用于监控实验过程是否被污染。

引物/探针混合液  针对DIV1 MCP基因设计。  探针通常标记FAM荧光基团。

�� 操作流程简述

样本采集与处理：

组织样本：取对虾的血淋巴、鳃、肝胰腺或淋巴器官。幼虾可取完整个体。

保存：若不能立即提取核酸，样本应保存在95%乙醇或-20℃冰箱中。

DNA提取：

使用商用基因组DNA提取试剂盒（柱提法/磁珠法）提取样本中的总DNA。

关键点：提取的DNA应尽量无蛋白、酚等抑制物。

试剂准备与加样：

将反应液和酶液在冰上解冻混匀。

按比例配制反应体系（通常为20-25 μL体系），向反应管中加入模板DNA（通常5-10 μL）。

必须设置：阴性对照（无菌水）和阳性对照（试剂盒提供）。

上机扩增：

将反应管放入荧光定量PCR仪。

推荐程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环反应：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（在此步收集荧光），进行40-45个循环。

结果判读：

阳性（+）：Ct值 < 38，且扩增曲线呈典型的"S"型指数增长。

可疑（±）：Ct值在 38-40 之间，建议复测或结合临床症状判断。

阴性（-）：无Ct值或Ct值 ≥ 40，且无扩增曲线。

质控要求：阳性对照Ct值应≤35，阴性对照应无扩增曲线。

⚠️ 注意事项与安全提示

严格分区操作：为防止气溶胶污染导致假阳性，实验必须严格分区（试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区），且各区物品专用。

试剂保存：试剂盒需在 -20℃ 条件下避光保存。酶混合物对温度敏感，应避免反复冻融。

行业标准：该检测方法的技术规范可参考《十足目虹彩病毒1感染检疫技术规范 SN/T 5487—2023》，该标准规定了详细的引物探针序列及反应体系配置。

临床意义：DIV1（SHIV）是近年来对虾养殖业危害极大的新发疫病，致死率高。早期检测有助于及时隔离病虾、消毒水体，防止疫情扩散。

公司正在出售的产品：

PCR（聚合酶链式反应）是一种基因扩增技术，

用于检测或定量特定DNA/RNA序列。其核心是通过温度循环（变性、退火、延伸）扩增目标基因片段，而非培养生物体。

关键点：

无需培养：PCR直接检测样本中的核酸，无需预先培养微生物或细胞。

应用场景：病原体检测（如病毒、细菌）、基因表达分析、遗传病诊断等。