嗜水气单胞菌核酸检测试剂盒（恒温荧光法） 新品

产品介绍：

产品核心信息

检测原理：基于恒温荧光检测技术（如环介导等温扩增技术，LAMP）。该技术利用特异性引物和具有链置换活性的DNA聚合酶，在恒定温度（通常为60℃-65℃）下进行核酸扩增。反应过程中，荧光信号会随着产物的增加而增强，通过仪器实时监测荧光变化即可判断结果。

检测对象：嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila），一种广泛存在于水体中、可引起鱼类疾病及人类肠胃炎的病原菌。

灵敏度：通常具有较高的灵敏度，检出限可达到 10³ copies/μl 基因组DNA，部分产品甚至更高。

适用仪器：适用于各类恒温荧光检测仪（如Genie II, ESE TubeScanner等）或具备相应荧光通道的荧光定量PCR仪。

�� 产品组成（以48测试为例）

试剂盒通常包含以下组分，具体体积可能因品牌而异：

组分名称  规格示例  说明

反应液 (Reaction Mix)  22 μL × 48管  预混了引物、酶、dNTPs等核心成分，需避光保存。

酶液 / B液  90 μL × 1支  含Bst DNA聚合酶等，需-20℃保存。

阳性对照 (Positive Control)  50 μL × 1支  含目标基因片段，用于验证试剂有效性。

阴性对照 (Negative Control)  250 μL × 1支  无菌水或缓冲液，用于监控污染。

(注：部分试剂盒可能将反应液和酶液预混为“2×Premix”，操作更简便。)

�� 操作流程简述

样本处理：

取患病动物组织或细菌培养物，使用基因组DNA提取试剂盒或煮沸法提取模板DNA。

注意：DNA纯度是检测灵敏度的关键。

试剂准备：

将试剂盒各组分从-20℃取出，在冰盒上完全解冻。

离心30秒，使管壁残留液体沉降至管底。

体系配制：

在超净台或生物安全柜中，向反应管（含预混液）中加入酶液和模板DNA（或对照品）。

通常体系为20-25 μL，需设置阴性对照和阳性对照。

上机扩增：

将反应管放入恒温荧光仪中。

设置程序：通常为 63℃ (或65℃) 反应 60分钟。

结果判读：

阳性：反应曲线呈典型指数增长，且Ct值（扩增时间）小于设定阈值（如35.0）。

阴性：无Ct值或Ct值大于阈值（如40），无扩增曲线。

可疑：Ct值在临界范围（如35-40之间），需复测确认。

⚠️ 注意事项与安全提示

防污染操作：由于该技术灵敏度极高，必须严格分区操作（样本制备区、模板添加区、扩增区），避免气溶胶污染导致假阳性。

物理防护：实验过程中穿戴实验服、乳胶手套，不同区域使用独立工具。

避光与冻融：反应液对光敏感，配制和储存过程应避光；试剂应避免反复冻融，以免活性下降。

废弃物处理：反应结束后，严禁开盖，以免扩增产物形成气溶胶污染环境。应将扩增管置于密封袋内丢弃。

用途限制：市面上大多数此类试剂盒标注为科研用途，不适用于临床诊断，结果需结合临床表现综合判断。

公司正在出售的产品：

PCR（聚合酶链式反应）是一种基因扩增技术，

用于检测或定量特定DNA/RNA序列。其核心是通过温度循环（变性、退火、延伸）扩增目标基因片段，而非培养生物体。

关键点：

无需培养：PCR直接检测样本中的核酸，无需预先培养微生物或细胞。

应用场景：病原体检测（如病毒、细菌）、基因表达分析、遗传病诊断等。