荧光假单胞菌核酸检测试剂盒（恒温荧光法） 新品

产品介绍：

检测原理与核心背景

检测原理：基于恒温荧光扩增技术（如LAMP或RAA）。该技术通过设计针对荧光假单胞菌基因组保守区（通常为16S rRNA基因或gyrB基因）的多组特异性引物，在恒定温度下（通常为60-65℃）对目标DNA进行指数级扩增。

在扩增过程中，随着DNA的合成，反应体系中的荧光染料（如SYTO-9）会嵌入双链DNA并释放荧光信号。

 仪器实时监测荧光信号的变化，根据Tt值（指数扩增时间）或终点荧光强度进行判定。

核心背景：荧光假单胞菌广泛存在于水、土壤和食品中。虽然它常被视为腐败菌（导致牛奶、肉类变质），但在某些情况下也可能成为机会性病原菌。该试剂盒可用于食品卫生质量控制、环境微生物监测及科研实验。

�� 产品核心参数与组成

项目  详细信息

检测方法  恒温荧光法 (如 LAMP)

检测靶标  荧光假单胞菌特异性基因 (如 16S rRNA)

产品规格  50T (即 50 次测试)

检测限  最低检测限可达 10³ copies/μL 基因组 DNA

主要组分  反应液A (含引物、dNTPs等)、反应液B (含Bst酶等)、阳性对照 (菌液DNA)、阴性对照 (无菌水)

��️ 操作流程

样本处理：提取待测样本（如食品匀浆液、水体样本、菌落）的基因组DNA。

试剂准备：在冰上将反应液A和反应液B按说明书比例混合，配制成预混液。

加样：将配制好的预混液分装到PCR管中，然后加入DNA模板，同时设置阳性和阴性对照。

恒温扩增：将反应体系放入恒温荧光检测仪（如 Genie II, ESE Tube Scanner 等）中，设置反应温度为 63℃，反应时间通常为 45-60分钟。

结果分析：仪器实时监测荧光信号变化，自动生成扩增曲线并判读结果。

�� 结果判读标准

结果类型  判读标准 (仪器法)  判读标准 (肉眼/目视法)  解释

阳性 (+)  荧光曲线呈典型指数增长，且 Tt 值 < 阈值 (如 30分钟)。  反应液发出绿色荧光 (或特定颜色)。  样品中检测到荧光假单胞菌，判定为阳性。

阴性 (-)  荧光曲线为直线，无指数增长期。  反应液为橙色 (或原始颜色)。  样品中未检测到荧光假单胞菌，判定为阴性。

无效  阳性对照未扩增，或阴性对照出现扩增。  阳性对照无颜色变化，或阴性对照变色。  实验失败（可能存在试剂失效或污染），结果无效，需重做。

�� 产品特点

快速便捷：无需复杂的热循环，全程检测时间通常在1-2小时内完成（含核酸提取），非常适合现场快速检测。

高灵敏度：最低检出限可达1000拷贝/微升，能够检测到极低含量的细菌。

高特异性：针对细菌保守基因设计引物，与其他常见革兰氏阴性菌（如大肠杆菌、沙门氏菌）无交叉反应。

⚠️ 注意事项

防止污染：恒温扩增技术灵敏度极高，极易受气溶胶污染影响。建议严格分区操作（试剂准备区、样本制备区、检测区），并使用带滤芯的枪头。

避光保存：反应液中的荧光染料对光敏感，试剂应 -20℃ 避光 保存，使用前避免长时间暴露在强光下。

适用范围：主要用于食品卫生检测、环境微生物监测和科研实验，通常仅供科研使用。

公司正在出售的产品：

高特异性

引物设计基于目标基因保守区域，可区分高度同源序列（如病毒变异株）。

高灵敏度

检测限低至10拷贝/反应，适用于微量样本。

高效扩增

热启动酶（如HotStarTaq）减少非特异性扩增，30分钟内完成40个循环。

防污染设计

UNG酶系统降解残留产物，避免交叉污染。

稳定性提升

冻干预混技术实现常温运输，操作便捷。