鸭源性核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

产品介绍：

检测原理与目的

检测原理：基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，采用TaqMan荧光探针法。试剂盒中含有针对鸭基因组特异性保守序列（通常靶向线粒体细胞色素b基因（Cyt b）或D-loop区）设计的特异性引物和荧光探针。

在PCR扩增过程中，随着目标DNA片段的指数级扩增，探针被Taq酶切降解，释放出荧光信号（通常为FAM通道）。

仪器实时监测荧光信号的累积，并根据Ct值（循环阈值）进行定性或定量分析。

 核心目的：

物种鉴别：准确鉴定肉制品（如烤鸭、肉松、香肠）、饲料中是否含有鸭肉成分，防止以次充好（如用其他禽肉冒充鸭肉）或虚假标注。

食品安全监管：确保清真食品、特定宗教食品或过敏人群食品中不含违规的鸭源性成分。

饲料安全：检测饲料中是否非法添加鸭源性肉骨粉。

�� 产品核心参数与组成

项目  详细信息

检测方法  实时荧光定量 PCR (TaqMan 探针法)

检测靶标  鸭源性特异性核酸片段 (如线粒体 Cyt b 基因)

产品规格  48T 或 50T (即 48/50 次测试)

检测限  最低检测限可达 0.1% (部分产品可达 1×10³ copies/mL)

主要组分  qPCR反应液 (含dNTPs、缓冲液)、酶混合液 (Taq酶)、引物探针混合液、阳性对照 (鸭基因组DNA)、阴性对照 (无菌水)

��️操作流程

样本处理：提取待测样本（如肉糜、饲料、中药材等）的基因组DNA。

试剂准备：在冰上将qPCR反应液、酶混合液和引物探针混合液按说明书比例混合，配制成预混液。

加样：将配制好的预混液分装到PCR管/板中，然后加入DNA模板，同时设置阳性和阴性对照。

qPCR扩增：将反应体系放入荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX96等）中，运行两步法程序：

预变性：95℃ 10 min

扩增循环：95℃ 15 sec → 60℃ 1 min (采集荧光)，40-45 个循环。

结果分析：仪器自动根据荧光信号和Ct值判断结果。

�� 结果判读标准

结果类型  判读标准  解释

阳性 (+)  扩增曲线呈典型的“S”型，且 Ct 值 ≤ 35-40。  样品中检测到鸭源性成分，判定为阳性。

阴性 (-)  无 Ct 值，或 Ct 值 ≥ 阈值，曲线为直线或无指数增长期。  样品中未检测到鸭源性成分，判定为阴性。

可疑  35 < Ct 值 ≤ 40，且扩增曲线有对数增长趋势。  建议重新提取核酸或复检，若仍为可疑或阳性，则判为阳性。

无效  阳性对照未扩增 (Ct值无或>阈值)，或阴性对照出现扩增。  实验失败（可能存在试剂失效或污染），结果无效，需重做。

�� 标准化与权威性

该检测方法通常参照ISO/TS 20224-10:2024国际标准（动物源性成分检测 第10部分：鸭DNA检测方法）进行。该标准已被转化为国家标准计划（计划号：20253188-Z-469），由全国生化检测标准化技术委员会归口，确保了检测结果的权威性和国际互认性。

⚠️ 注意事项

防止污染：qPCR灵敏度极高，极易受气溶胶污染影响。建议严格分区操作（试剂准备区、样本制备区、扩增区），并使用带滤芯的枪头。

避光保存：反应液中的荧光探针成分对光敏感，试剂应 -20℃ 避光 保存，使用前避免长时间暴露在强光下。

内源基因对照：为了确保检测结果的准确性（排除假阴性），建议同时使用鸭内源基因检测试剂盒或通用的脊椎动物内参基因进行检测，以确认样本DNA提取成功且无PCR抑制物。

适用范围：主要用于食品安全检测、饲料成分监控和科研实验，通常仅供科研使用。

公司正在出售的产品：

高特异性

引物设计基于目标基因保守区域，可区分高度同源序列（如病毒变异株）。

高灵敏度

检测限低至10拷贝/反应，适用于微量样本。

高效扩增

热启动酶（如HotStarTaq）减少非特异性扩增，30分钟内完成40个循环。

防污染设计

UNG酶系统降解残留产物，避免交叉污染。

稳定性提升

冻干预混技术实现常温运输，操作便捷。