小鼠气管上皮细胞
产品信息:
产品名称 小鼠气管上皮细胞
组织来源 气管
种属 小鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Mouse Tracheal Epithelial Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 上皮细胞样 | 货号 | P-X1765 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的小鼠气管上皮细胞采用链霉蛋白酶-中性蛋白酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的小鼠气管上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:小鼠气管上皮细胞
组织来源:气管
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶小鼠气管上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
小鼠气管上皮细胞分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成,有弹性,软骨为“C”字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜,表面覆盖纤毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒,纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出,以净化吸入的气体。气管上皮是气道与外界环境接触的第一道防线,不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞,还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及免疫反应。体外培养的原代气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性,因此,在基础及临床研究中极为重要。
原代细胞接种:
细胞计数与密度调整
使用血球计数板或细胞计数仪准确计数,调整细胞密度至合适范围(不同细胞类型差异较大,一般为1×10⁵-1×10⁶cells/ml)
密度过低:细胞无法分泌足够的生长因子,难以存活;密度过高:细胞竞争营养物质,易出现接触抑制
培养基选择
优先使用原代细胞专用培养基,若使用通用培养基,需添加合适的生长因子、血清等补充成分(如成纤维细胞添加FGF,内皮细胞添加VEGF)
血清浓度:原代细胞培养血清浓度一般为10%-20%,部分特殊细胞(如神经细胞)需使用无血清培养基
培养环境控制
温度:哺乳动物细胞一般为37℃,鸟类细胞38.5℃,昆虫细胞27℃
CO₂浓度:大多数细胞需要5%CO₂,维持培养基pH在7.2-7.4之间
湿度:培养箱湿度保持在70%-80%,避免培养基蒸发过快
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通用注意事项:
无菌操作:所有操作全程在超净台内进行,定期对超净台、培养箱进行消毒,使用无菌的培养基、血清、试剂
细胞状态监测:每天观察细胞形态、密度、颜色变化,记录生长情况,若发现细胞出现污染、形态异常、生长缓慢等问题,及时处理
培养基更换:原代细胞培养初期每2-3天更换一次培养基,传代后每1-2天更换一次,根据培养基颜色变化(变黄表示营养耗尽)灵活调整
避免过度操作:原代细胞较为脆弱,避免频繁吹打、离心,尽量减少对细胞的机械损伤
冻存备份:原代细胞分离成功后,及时冻存部分细胞作为备份,冻存液使用90%血清+10%DMSO,采用梯度降温法冻存