细胞简介:

兔破骨细胞分离自骨组织和骨髓;破骨细胞是骨组织中的多核巨细胞,位于骨组织表面的浅凹处。目前一般认为破骨细胞是分离自骨骼外的造血系统,其前体可能属于造血干细胞的前单核细胞。破骨细胞的主要功能是维持骨吸收和骨形成的相对平衡,若失去这种平衡则发生病理性变化。因此多数学者从破骨细胞着手研究破骨细胞的结构、功能探讨骨吸收,形成相互平衡的机制。但破骨细胞是一种终末分化细胞,属于不增殖细胞群,不能增殖和传代,只能进行原代培养且存活时间较短。
产品名称 | 兔破骨细胞 | 产品货号 | P-X2146 |
英文名称 | Rabbit Osteoclast Cells | 规格 | 5×10^5 |
报告 | 提供免疫荧光鉴定报告 | 组织来源 | 骨髓 |
产品信息:

方法简介:实验室分离的兔破骨细胞采用机械分离法/密度梯度离心法和骨髓单核细胞诱导法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的兔破骨细胞经TRAP染色检测,纯度可达30%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:兔破骨细胞
组织来源:骨髓
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:多核、巨细胞
传代特性:属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液:0.25%胰蛋白酶兔破骨细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞传代:

传代时机判断
细胞汇合度达到80%-90%时进行传代,避免细胞过度汇合导致接触抑制,影响增殖能力
观察细胞状态:细胞形态正常,无明显漂浮、污染迹象
消化环节控制
消化前准备:吸出旧培养基,用PBS轻轻冲洗细胞1-2次,去除血清(血清会抑制胰蛋白酶活性)
消化液选择:同原代分离,根据细胞类型选择合适的消化酶,胰蛋白酶消化时间一般为1-5分钟,胶原酶消化时间为10-30分钟
消化终止:显微镜下观察到细胞回缩变圆、间隙增大时,立即加入含血清的培养基终止消化,血清浓度不低于10%
细胞吹打:用移液器轻轻吹打细胞,避免过度用力导致细胞破裂,吹打次数一般为10-15次
传代比例控制
传代比例根据细胞生长速度调整:生长速度快的细胞(如成纤维细胞)可按1:3-1:6传代,生长速度慢的细胞(如内皮细胞、神经细胞)按1:2传代
首次传代比例可适当提高(如1:2),待细胞适应体外培养环境后再调整为常规比例
传代后培养
接种后轻轻晃动培养瓶,使细胞均匀分布,放入培养箱中培养
24小时内不要晃动培养瓶,避免细胞贴壁不牢
培养24-48小时后观察细胞贴壁情况,更换新鲜培养基,去除未贴壁的死细胞和细胞碎片
细胞分离与接种:

酶消化的“度”:酶液浓度和消化时间需精准控制,如胰蛋白酶浓度通常为0.25%,消化时间5-15分钟(根据组织类型调整),消化期间每隔3-5分钟轻轻晃动容器,镜下观察到细胞变圆、间隙增大时,立即加入含血清的培养基终止消化。
吹打力度适中:用巴氏吸管吹打细胞悬液时,避免用力过猛产生大量气泡,以吹打后细胞悬液呈均匀雾状为宜,一般吹打10-15次即可,过度吹打会导致细胞膜破裂。
接种密度适配:根据细胞增殖速度调整接种密度,增殖快的细胞(如成纤维细胞)可适当降低密度,增殖慢的细胞(如神经元)需提高接种密度,确保细胞能相互支持生长。
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