小鼠骨细胞
产品信息:
产品名称 小鼠骨细胞
组织来源 骨组织
种属 小鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Mouse Osteocyte Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 梭形、多角形 | 货号 | P-X1892 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的小鼠骨细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的小鼠骨细胞经骨钙素免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:小鼠骨细胞
组织来源:骨组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:不增殖;不传代
消化液:0.25%胰蛋白酶小鼠骨细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
小鼠骨细胞分离自骨组织;骨组织的细胞成分包括骨原细胞、成骨细胞、骨细胞和破骨细胞。只有骨细胞存在于骨组织内,其他三种细胞均位于骨组织的边缘。骨细胞(Osteocyte)是人体骨骼中最主要的细胞成分。在成年人骨骼中,骨细胞占细胞总数量的90%~95%,大约是成骨细胞数量的20倍。骨细胞生长在骨骼内部的骨基质中。骨细胞的细胞体呈梭形或类圆形,位于基质构成的骨陷窝内。与神经细胞类似,每个骨细胞具有大量向外延伸的突触,而这些突触均位于由骨基质构成的骨小管结构中。通过这些突触,骨细胞能够与骨表面的细胞、周围其它的骨细胞进行“交流”。普遍认为,骨细胞起源于成骨细胞。在骨形成的终末阶段,成骨细胞将可能有3种不同的归宿:分化成为骨细胞、转移至骨表面成为暂不活动的成骨细胞、进入程序死亡过程(凋亡)。骨细胞为扁椭圆形多突起的细胞,核亦扁圆、染色深。胞质弱嗜碱性。电镜下,胞质内有少量溶酶体、线粒体和粗面内质网,高尔基复合体亦不发达。骨细胞夹在相邻两层骨板间或分散排列于骨板内。相邻骨细胞的突起之间有缝隙连接。在骨基质中,骨细胞胞体所占据的椭圆形小腔,称为骨陷窝,其突起所在的空间称骨小管。相邻的骨陷窝借骨小管彼此通连。骨陷窝和骨小管内均含有组织液,骨细胞从中获得养分。
原代细胞接种:
细胞计数与密度调整
使用血球计数板或细胞计数仪准确计数,调整细胞密度至合适范围(不同细胞类型差异较大,一般为1×10⁵-1×10⁶cells/ml)
密度过低:细胞无法分泌足够的生长因子,难以存活;密度过高:细胞竞争营养物质,易出现接触抑制
培养基选择
优先使用原代细胞专用培养基,若使用通用培养基,需添加合适的生长因子、血清等补充成分(如成纤维细胞添加FGF,内皮细胞添加VEGF)
血清浓度:原代细胞培养血清浓度一般为10%-20%,部分特殊细胞(如神经细胞)需使用无血清培养基
培养环境控制
温度:哺乳动物细胞一般为37℃,鸟类细胞38.5℃,昆虫细胞27℃
CO₂浓度:大多数细胞需要5%CO₂,维持培养基pH在7.2-7.4之间
湿度:培养箱湿度保持在70%-80%,避免培养基蒸发过快
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原代细胞实验注意事项:
取材要快、要新鲜、全程无菌
组织离体时间越短越好,冰上操作,减少缺血损伤。
严格控制细胞代数
原代细胞只建议用 P0~P3,代数越高越容易分化、结果越不可靠。
接种密度宁高不低
原代细胞普遍怕稀,太稀不贴壁、不生长、容易凋亡。
消化是关键,宁轻勿重
胰酶 / 胶原酶只消化到细胞变圆就终止,过度消化必死一批。
吹打轻柔,避免机械损伤。
培养基和血清不要随便换批次
血清、基础培养基、添加因子固定厂家固定批次,换批次必须先预实验。
避免频繁折腾细胞
少开培养箱门,不反复观察、不反复拿进拿出,温度、pH 波动对原代杀伤极大。