小鼠骨髓单核细胞
产品信息:
产品名称 小鼠骨髓单核细胞
组织来源 骨髓
种属 小鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Mouse Bone Marrow Monocyte Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 巨噬细胞样 | 货号 | P-X1939 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的小鼠骨髓单核细胞采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的小鼠骨髓单核细胞经CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:小鼠骨髓单核细胞
组织来源:骨髓
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:巨噬细胞样
传代特性:不增殖;不传代
消化液:0.25%胰蛋白酶小鼠骨髓单核细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
小鼠骨髓单核细胞分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓单核细胞是一种未成熟的单核细胞,在骨髓细胞中约占0.04%,被认为是破骨细胞的前体细胞,较外周血单个核细胞诱导的破骨细胞得率高、全骨髓诱导法产生的破骨细胞数量多,纯度高,较脾细胞诱导法分化效率高。骨髓单核细胞(BMMNCs)是从股骨或胫骨骨髓中分离提取出来的原代细胞,它属干细胞类型。目前,大多数研究用淋巴细胞分离液分离提取骨髓单核细胞,最近也有采用免疫磁珠分离法分离骨髓单核细胞。
细胞消化与传代:
方法一:利多卡因消化法
吸出培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞1次
添加1ml 12mM利多卡因消化液,轻轻转动培养瓶使液体覆盖瓶底,37℃温浴3-5分钟
显微镜下观察到细胞回缩变圆后,加入5ml完全培养基稀释消化液
轻轻吹打混匀细胞,1200rpm离心5分钟,弃上清后用完全培养基重悬接种
方法二:胰酶消化法
若利多卡因消化效果不佳,可更换为0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液,重复上述操作,消化时间控制在1-2分钟
方法三:细胞刮取法
若细胞仍无法消化,加入3ml完全培养基终止消化,用无菌细胞刮轻轻刮取细胞(此方法易造成细胞机械损伤,不推荐)
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收货与处理流程:
1. 收货检查
收到细胞后首先观察T25培养瓶瓶身是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有异常及时联系。
2. 细胞复苏(仅针对冻存细胞)
将冻存管迅速放入37℃温水中摇晃融化,时间约1分钟
加入4-5ml完全培养基混匀,1000RPM常温离心4-5分钟
弃去上清液,补加1-2ml培养液吹匀,移入含5ml培养基的培养瓶中培养过夜,第二天换液并检查细胞密度
3. 新鲜细胞处理
用75%酒精消毒培养瓶瓶身,拆下封口膜
放入37℃、5%CO₂、饱和湿度的培养箱中静置3-4小时,稳定细胞状态后再进行后续操作