细胞简介:

兔肌腱干细胞分离自肌腱组织;肌腱是肌腹两端的索状或膜状致密结缔组织,便于肌肉附着和固定。一块肌肉的肌腱分附在两块或两块以上的不同骨上,是由于肌腱的牵引作用才能使肌肉的收缩带动不同骨的运动。每一块骨骼肌都分成肌腹和肌腱两部分,肌腹由肌纤维构成,色红质软,有收缩能力,肌腱由致密结缔组织构成,色乳白较硬,没有收缩能力。肌腱把骨骼肌附着于骨骼。长肌的肌腱多呈圆索状,阔肌的肌腱阔而薄,呈膜状,又叫腱膜。此处的肌腹即为通常所说的红肌,而肌腱即为白肌,分别控制肌肉的力量、爆发力和耐力。肌腱干细胞(TSCs)是一种来源于肌腱组织的间充质干细胞,其具有多向分化潜能,并且在外源性前列腺素E2作用下异常分化。体外培养时该细胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潜能等干细胞的普遍特性。肌腱干细胞可以被诱导向脂肪细胞、软骨样细胞、骨细胞分化;在裸鼠模型中,肌腱干细胞还可以形成肌腱样组织,软骨样组织以及腱-骨连接样组织等。相比骨髓间充质干细胞而言,TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力,软骨相关基因和肌腱相关基因表达更高,具有更好的成骨、成脂和成软骨能力,因此可以作为组织工程中的种子细胞。
产品名称 | 兔肌腱干细胞 | 产品货号 | P-X2168 |
英文名称 | Rabbit Tendon Stem Cells | 规格 | 5×10^5 |
报告 | 提供免疫荧光鉴定报告 | 组织来源 | 肌腱组织 |
产品信息:

方法简介:实验室分离的兔肌腱干细胞采用胶原酶、中性蛋白酶混合消化法并通过肌腱干细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的兔肌腱干细胞经CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:兔肌腱干细胞
英文简称:TSPCs
组织来源:肌腱组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液:0.25%胰蛋白酶兔肌腱干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞传代:

传代时机判断
细胞汇合度达到80%-90%时进行传代,避免细胞过度汇合导致接触抑制,影响增殖能力
观察细胞状态:细胞形态正常,无明显漂浮、污染迹象
消化环节控制
消化前准备:吸出旧培养基,用PBS轻轻冲洗细胞1-2次,去除血清(血清会抑制胰蛋白酶活性)
消化液选择:同原代分离,根据细胞类型选择合适的消化酶,胰蛋白酶消化时间一般为1-5分钟,胶原酶消化时间为10-30分钟
消化终止:显微镜下观察到细胞回缩变圆、间隙增大时,立即加入含血清的培养基终止消化,血清浓度不低于10%
细胞吹打:用移液器轻轻吹打细胞,避免过度用力导致细胞破裂,吹打次数一般为10-15次
传代比例控制
传代比例根据细胞生长速度调整:生长速度快的细胞(如成纤维细胞)可按1:3-1:6传代,生长速度慢的细胞(如内皮细胞、神经细胞)按1:2传代
首次传代比例可适当提高(如1:2),待细胞适应体外培养环境后再调整为常规比例
传代后培养
接种后轻轻晃动培养瓶,使细胞均匀分布,放入培养箱中培养
24小时内不要晃动培养瓶,避免细胞贴壁不牢
培养24-48小时后观察细胞贴壁情况,更换新鲜培养基,去除未贴壁的死细胞和细胞碎片
细胞分离与接种:

酶消化的“度”:酶液浓度和消化时间需精准控制,如胰蛋白酶浓度通常为0.25%,消化时间5-15分钟(根据组织类型调整),消化期间每隔3-5分钟轻轻晃动容器,镜下观察到细胞变圆、间隙增大时,立即加入含血清的培养基终止消化。
吹打力度适中:用巴氏吸管吹打细胞悬液时,避免用力过猛产生大量气泡,以吹打后细胞悬液呈均匀雾状为宜,一般吹打10-15次即可,过度吹打会导致细胞膜破裂。
接种密度适配:根据细胞增殖速度调整接种密度,增殖快的细胞(如成纤维细胞)可适当降低密度,增殖慢的细胞(如神经元)需提高接种密度,确保细胞能相互支持生长。
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