兔子宫成纤维细胞
产品信息:
产品名称 兔子宫成纤维细胞
组织来源 子宫组织
种属 兔
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Rabbit Uterine Fibroblast Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 货号 | P-X2128 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的兔子宫成纤维细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的兔子宫成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:兔子宫成纤维细胞
组织来源:子宫组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液:0.25%胰蛋白酶兔子宫成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
兔子宫成纤维细胞分离自子宫组织;子宫是孕育胎儿的器官,位于盆腔中部,膀胱与直肠之间,其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持,这些结构受损或松弛时,可以引起子宫脱垂。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来;成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的子宫成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。子宫成纤维细胞的主要特征:①是子宫的重要细胞组成,在体外易于培养;②在子宫损伤后能修复和重塑子宫;③在子宫炎症时能有效控制炎症扩散。
原代细胞实验要点:
一、取材与分离
新鲜、无菌:组织离体越快越好,全程冰上操作。
去除杂质:剔除脂肪、结缔组织、血污,减少污染和消化干扰。
温和消化:
控制酶浓度、温度、时间
及时终止消化,避免细胞过度损伤
过筛过滤:去除组织块,获得单细胞悬液。
二、接种与培养
密度关键:原代细胞普遍怕稀,密度太低不贴壁、不长。
完全贴壁后再换液:刚接种别乱动。
专用培养基:
内皮、上皮、平滑肌、神经元等尽量用专用原代培养基
血清质量影响极大,建议批次验证
CO₂、湿度、温度严格稳定,避免频繁开关门。
三、传代与冻存
不要等太满:汇合度 70%–80% 就传,不要等到堆积。
消化监控:镜下观察细胞变圆、间隙变大立即终止。
冻存保护:
标准:90% 血清 + 10% DMSO
程序降温,尽快转入液氮
原代细胞冻存复苏能力弱,尽量早冻、多冻。
四、污染与状态判断
一旦浑浊、pH 骤变、有颗粒:直接丢弃,不要救。
细胞状态好:
形态均一、轮廓清晰
生长均匀、无局部堆积
出现分化、拉长、多核、空泡多:说明老化 / 状态差,不建议继续实验。
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实验后处理:
废弃样本处理:
细胞废弃物消毒:实验后的培养基、细胞悬液需用含有效氯的消毒液处理30分钟后再排放,培养瓶、吸管等耗材需高压灭菌后丢弃。
动物组织处理:剩余的动物组织需放入专用的生物危害垃圾袋,由专业机构进行无害化处理,避免生物污染。
实验设备清洁:
超净工作台清洁:实验结束后用75%酒精擦拭台面,打开紫外灯照射30分钟,关闭风机。
培养箱定期清洁:每周用75%酒精擦拭培养箱内壁和隔板,每2周更换一次培养箱内的水盘,避免滋生细菌。