兔肝外胆管上皮细胞 新品

细胞简介：

兔肝外胆管上皮细胞分离自肝外胆管组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。临床上常见的胆管病变如胆道闭锁、先天性胆总管囊肿、原发性硬化性胆管炎等，都是以胆管上皮细胞为病变的靶位，引起胆管上皮的损伤。了解正常胆管上皮细胞的生物学特征和病变胆管上皮细胞的病理生理学特征对研究胆管病变的发病机制、诊断和治疗具有重要意义。

产品信息：

方法简介：实验室分离的兔肝外胆管上皮细胞采用胶原酶灌注消化法后，再用胶原酶-DNA酶联合消化，接种至预先包被鼠尾胶原的培养瓶中，通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的兔肝外胆管上皮细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：兔肝外胆管上皮细胞

组织来源：胆管组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%胰蛋白酶兔肝外胆管上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞分离：

组织取材

无菌操作是底线：取材前对动物/组织进行严格消毒，全程在超净台内操作，所有工具提前灭菌

新鲜度决定活性：取材后立即放入预冷的含双抗的PBS中，30分钟内完成分离，若无法即时处理，可暂存于4℃冰箱（不超过24小时）

精准取材：避开血管、脂肪、结缔组织等非目标组织，比如分离肝细胞时要剔除胆囊，分离神经细胞时要去除脑膜

组织处理

机械法：通过剪碎、研磨、过滤等方式分散组织，适用于结缔组织较少的组织（如肝脏、肾脏），注意力度适中，避免过度研磨损伤细胞

酶解法：根据组织类型选择合适的酶：

胰蛋白酶：适用于消化上皮组织、肝、肾等，浓度0.25%-0.5%，消化时间15-30分钟，37℃

胶原酶：适用于消化结缔组织、脂肪组织、肌肉组织等，浓度0.1%-0.3%，消化时间1-4小时，37℃，可加入EDTA增强效果

透明质酸酶：常与胶原酶联用，消化软骨、滑膜等富含透明质酸的组织

联合法：机械剪碎后再进行酶解，兼顾效率与细胞活性

细胞筛选与纯化

过滤：使用200-400目细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织块

离心：800-1200RPM离心5-8分钟，弃上清后用PBS重洗2-3次，去除细胞碎片和酶液

特异性纯化：使用差速贴壁法（利用不同细胞贴壁速度差异）、密度梯度离心法（如Percoll、Ficoll）、免疫磁珠分选或流式细胞术，获得高纯度目标细胞
实验后处理：

废弃样本处理：

细胞废弃物消毒：实验后的培养基、细胞悬液需用含有效氯的消毒液处理30分钟后再排放，培养瓶、吸管等耗材需高压灭菌后丢弃。

动物组织处理：剩余的动物组织需放入专用的生物危害垃圾袋，由专业机构进行无害化处理，避免生物污染。

实验设备清洁：

超净工作台清洁：实验结束后用75%酒精擦拭台面，打开紫外灯照射30分钟，关闭风机。

培养箱定期清洁：每周用75%酒精擦拭培养箱内壁和隔板，每2周更换一次培养箱内的水盘，避免滋生细菌。

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