白水河病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒用于白水河病毒的荧光定量RT-PCR检测，采用染料法技术，具有高灵敏度和特异性。试剂盒包含预混引物、阳性对照及反应体系所需组分，支持50次20μL体系的检测，适用于定性和定量分析，定量线性范围覆盖6个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。

组分清单

荧光PCR预混液（含引物、探针、dNTPs、酶等）

阳性对照（1×10⁸拷贝/μL DNA片段）

荧光PCR专用模板稀释液

核酸释放剂试用装（可选，需单独订购完整版）

操作步骤

1. 阳性对照稀释（标准曲线制备）

注意事项：操作需在独立区域进行，避免污染。阳性对照为无传染性DNA片段。

步骤：

标记6管（7~2号），每管加45μL稀释液。

7号管加5μL原液（1×10⁸拷贝/μL），震荡混匀，得10⁷拷贝/μL标准品。

依次梯度稀释至10²拷贝/μL（6~2号管），每步换枪头，冰上保存。

2. 样品DNA制备

使用自选或配套核酸提取方法，建议设置阳性/阴性对照（N+2样本）。

阳性对照：10μL阳性对照1000倍稀释液+水；阴性对照：纯水。

3. PCR反应体系（20μL）

每反应需加入：

10μL预混液

2μL模板DNA（样品或标准品）

8μL无核酸酶水

反应程序：按仪器要求设置变性、退火、延伸步骤（建议95℃ 30s；60℃ 30s，40循环）。

结果分析

定量检测：根据标准曲线（Ct值-log拷贝数）计算样品病毒载量。

定性检测：Ct值≤35判为阳性，＞35需复测。

注意事项

避免反复冻融试剂，开封后尽快使用。

操作全程需防污染，使用带滤芯枪头及独立分区。

本试剂盒仅供科研使用，不适用于临床诊断。

有效期与储存

未开封：-20℃保存12个月；开封后分装保存，避免多次冻融。

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