白蛉热西西里病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

产品概述

白蛉热西西里病毒（Sandfly Fever Sicilian Virus, SFSV）是一种RNA病毒，主要通过白蛉叮咬传播，可引起白蛉热，症状包括发热、头痛、肌肉疼痛等，严重时可导致脑炎。白蛉热西西里病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒是基于SYBR Green I染料法开发的分子诊断试剂，用于快速、灵敏地检测白蛉热西西里病毒的RNA。

性能参数

灵敏度：检测下限可达100拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级。

特异性：引物针对病毒高度保守区设计，无交叉反应。

适用仪器：兼容ABI、Bio-Rad、LightCycler等主流荧光定量PCR仪。

试剂盒组成

核心组分：预混PCR缓冲液、引物探针混合物、阳性对照（非传染性DNA片段）、阴性对照。

自备试剂：样本RNA/DNA、无RNA酶水、氯仿/异丙醇（若需抽提RNA）。

操作步骤

1. 样本处理（RNA抽提）

裂解细胞后加入氯仿，离心分离水相；异丙醇沉淀RNA，离心后洗涤并溶解于无RNA酶水。

2. 标准曲线制备（以6个10倍稀释梯度为例）

使用试剂盒提供的阳性对照，依次稀释至10^1–10^6拷贝/μL，避免交叉污染。

3. PCR反应体系配置

按20μL体系混合模板、预混液及引物探针，避免反复冻融试剂。

4. 扩增程序

预变性：95℃ 5分钟；循环阶段：95℃ 10秒→60℃ 30秒（40循环），于FAM通道采集信号。

注意事项

防污染：使用带滤芯枪头，分区操作（样本处理、试剂配置、扩增区分离）。

稳定性：底物避光保存，避免反复冻融；OD值需立即读取。

质量控制：每批次实验需包含阴/阳性对照，排除假阴性。

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