猪流行性腹泻病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

猪流行性腹泻病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量RT-PCR技术，专用于检测猪流行性腹泻病毒（PEDV）的核酸。适用于临床样本、环境样本及科研中PEDV的快速、高灵敏度检测。

产品特点

即开即用：用户仅需提供病毒RNA模板，无需额外配制反应体系。

高特异性：引物针对PEDV保守序列设计，与其他常见猪肠道病毒无交叉反应。

高灵敏度：检测下限可达10^2拷贝/μL，线性范围覆盖5个数量级。

双重质控：包含阳性质控品（PEDV标准品）和阴性质控品（无核酸酶水），确保结果可靠性。

兼容性强：适用于主流荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX等）。

包装规格

反应液A（预混Master Mix）：250 μL ×1管

引物探针混合液B（含染料标记探针）：50 μL ×1管

阳性质控品（PEDV RNA，1×10^5 copies/μL）：50 μL ×1管

阴性质控品（无核酸酶水）：50 μL ×1管

说明书：1份

储存条件与有效期

储存温度：-20℃以下避光保存，避免反复冻融。

有效期：12个月。

运输条件：低温干冰或含冰袋的泡沫箱运输（-20℃以下）。

检验原理

采用SYBR Green染料法实时荧光定量RT-PCR技术，通过特异性引物扩增PEDV靶序列，染料与双链DNA结合后释放荧光信号，通过Ct值定量分析病毒载量。

适用样本

猪粪便、肠道组织、血清等临床样本中提取的RNA。

操作步骤

RNA提取：按标准方法提取样本RNA。

反应体系配制：取反应液A 10 μL、引物探针混合液B 2 μL、RNA模板8 μL，总体积20 μL。

PCR程序设置：

逆转录：50℃ 15分钟

预变性：95℃ 3分钟

扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光）

结果分析：根据标准曲线计算样本病毒载量，阴性/阳性判断依据Ct值及扩增曲线形态。

注意事项

实验需在PCR洁净环境下操作，避免气溶胶污染。

试剂解冻后需彻底混匀，短暂离心后使用。

临床样本处理需遵循生物安全规范，废弃物需无害化处理。

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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