猪托克特诺病毒（猪细环病毒）染料法荧光定量PCR试剂盒

猪托克特诺病毒（猪细环病毒）染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

用于定性检测猪圆环病毒（PCV）基因组，适用于临床样本（如咽拭子、鼻拭子、粪便）及生物制品原料（如猪胰蛋白酶）的污染筛查，对疫病诊断和防控具有指导意义。

适用样本：

血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物等。

检测原理

采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对PCV基因组保守区域设计特异性引物。

PCR扩增过程中，SYBR Green与双链DNA结合释放荧光信号，通过仪器实时监测荧光强度，实现病毒核酸的定性检测。

试剂盒组成

主要组分：

PCR反应预混液（含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等）

SYBR Green荧光染料

阳性对照（PCV-2标准品）

阴性对照（无核酸酶水）

需自备耗材：

病毒DNA提取试剂（推荐配套提取试剂盒，如SHENTEK® Virus DNA/RNA Extraction Kit）。

性能参数

灵敏度：

最低检测限为50拷贝/反应。

特异性：

不与猪、牛等其他动物基因组或常见工程细胞系（如CHO、Vero、293T）发生交叉反应。

重复性：

批内及批间变异系数（CV）≤5%。

操作步骤

样本处理：

使用配套提取试剂盒提取样本DNA，建议提取后立即检测或-20℃保存。

PCR反应体系配制：

按说明书比例混合预混液、引物、模板DNA及荧光染料。

上机检测：

推荐仪器：ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler 480等荧光定量PCR仪。

反应程序：95℃预变性5分钟→（95℃ 10秒→60℃ 30秒）×40循环→熔解曲线分析。

结果判读

阳性判定：

Ct值≤35且熔解曲线峰值与阳性对照一致。

阴性判定：

无Ct值或Ct值>40。

储存与有效期

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

有效期：12个月。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，防止污染。

阳性对照需单独存放，避免与其他试剂交叉污染。

本试剂盒仅限科研或工业检测使用，不可用于临床诊断。

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