猪圆环病毒通用染料法荧光定量PCR试剂盒

猪圆环病毒通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术，通过染料法检测猪圆环病毒（PCV）通用型核酸，适用于临床样本、环境样本或科研中PCV的定性检测，为疫病诊断与流行病学监测提供依据。

检验原理

采用特异性引物及荧光染料（如SYBR Green I），靶向PCV保守基因区域进行扩增。

PCR过程中，染料与双链DNA结合释放荧光信号，通过仪器实时监测荧光强度，实现病毒核酸的定量或定性分析。

试剂组成

反应预混液：含DNA聚合酶、dNTPs及缓冲体系（500μL×2管，避光保存）。

荧光PCR引物混合液：特异性引物（100μL，白盖）。

阳性对照：PCV-U标准品（1×10^8拷贝/μL，50μL，红盖）。

阴性对照：无核酸酶水（250μL）。

病毒裂解液（选配）：用于样本前处理（9mL，试用装）。

储存条件与有效期

-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤5次），有效期12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括ABI 7500、Bio-Rad CFX、LightCycler等。

操作步骤

样本处理：按规范提取待测样本DNA，建议使用配套裂解液。

反应体系配制：每20μL反应含10μL预混液、2μL引物混合液、2μL模板及6μL无核酸酶水。

程序设置：

预变性：95℃ 3分钟；

循环：95℃ 15秒→60℃ 30秒（40循环，采集荧光）。

结果判读：通过扩增曲线及Ct值分析，阴性/阳性对照需符合预期。

注意事项

不同批号组分禁止混用，避免交叉污染。

本试剂盒科研专用，临床诊断需结合其他检测方法。

操作需在PCR洁净环境下进行，废弃物品按生物安全规范处理。

性能参数

灵敏度：≥100拷贝/反应；

特异性：与PCV-1/2型及其他常见猪病原体无交叉反应。

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