丙酸蛛网菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品用途

科研用，适用于丙酸蛛网菌核酸的快速、高灵敏度检测，不适用于临床诊断。

产品特点

即开即用：预混优化反应体系，用户仅需提供模板RNA/DNA。

高灵敏度与特异性：引物针对丙酸蛛网菌高度保守区域设计，避免交叉反应。

内置对照：含阳性对照（人工合成DNA标准品）和阴性对照，便于结果判读。

兼容性广：适配主流荧光定量PCR仪（如ABI、Bio-Rad、LightCycler等）。

试剂盒组成

| 组分名称 | 规格/数量 |

| 预混qPCR反应液（含染料） | 1 mL × 1管 |

| 丙酸蛛网菌特异性引物 | 25μL × 1管 |

| 阳性对照（PC） | 50μL × 1管 |

| 阴性对照（NC） | 50μL × 1管 |

| 说明书 | 1份 |

注：不同批号组分不可混用，使用前需短暂离心。

实验操作步骤

样本制备

推荐使用配套核酸提取试剂盒，按说明书提取样本DNA/RNA。

模板浓度建议：10–100 ng/μL（纯度A260/A280≈1.8–2.0）。

反应体系配制（冰上操作）

每20μL反应体系：

预混液10μL + 引物0.8μL + 模板2μL + RNase-free水补足至20μL。

阴性/阳性对照：分别加入2μL NC或PC替代模板。

PCR扩增

程序设置（以ABI仪器为例）：

预变性：95℃ 3 min → 循环阶段（40 cycles）：95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（荧光采集） → 72℃ 20 sec。

熔解曲线分析：60–95℃，升温速率0.5℃/sec。

结果判读

阳性：Ct值≤35，且熔解曲线为单一峰值。

可疑：Ct值35–40，建议重复检测。

阴性：无Ct值或熔解曲线异常。

注意事项

实验分区操作（样本制备区、模板添加区、扩增区），避免污染。

使用无核酸酶耗材（吸头、离心管等）。

若样本为病原体，需在生物安全柜中处理。

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