猪胸膜肺炎放线杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

猪胸膜肺炎放线杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

本产品基于染料法荧光定量PCR技术，专用于检测猪胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae）的核酸，适用于临床样本、环境样本或培养物的病原学定性及定量分析。

检验原理

技术原理：采用SYBR Green荧光染料实时监测PCR扩增过程，通过荧光信号累积与循环阈值（Ct值）实现靶标核酸的检测。

性能参数

灵敏度：最低检测限为100拷贝/反应。

特异性：引物针对猪胸膜肺炎放线杆菌高度保守区设计，避免与其他生物DNA交叉反应。

定量范围：线性范围覆盖至少5个数量级（需配合标准品使用）。

质控设计：提供阳性对照，用于排除假阴性结果。

试剂组成

| 名称 | 规格 |

| 2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5 mL ×1管 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL ×1管 |

| 超纯水 | 1 mL ×1管 |

| 染料法qPCR引物混合液 | 50次反应用量 |

样本要求

样本类型：组织、细胞、血液或细菌培养物等。

保存条件：

短期保存：-20℃冷藏；

长期保存：液氮或干冰，或置于Trizol液中。

注意事项：

避免反复冻融DNA/RNA样本；

提供样本时需注明物种、基因名称及背景信息。

操作步骤

模板制备：按规范提取样本DNA，建议使用试剂盒配套稀释液调整浓度。

反应体系：20 μL体系（含MasterMix、引物、模板DNA）。

PCR程序：

预变性：95℃ 5分钟；

扩增循环：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循环）；

熔解曲线分析：60℃~95℃（可选）。

结果判读

定性分析：Ct值≤35且熔解曲线单一峰为阳性。

定量分析：需使用标准品绘制标准曲线，计算拷贝数。

储存与稳定性

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

有效期：12个月（见包装标签）。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，防止污染；

不同批号试剂组分不可混用；

熔解曲线分析可辅助验证扩增特异性。

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