沙氏住白细胞原虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

沙氏住白细胞原虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于沙氏住白细胞原虫（Leucocytozoon sabrezis）的定性与定量检测。适用于科研用途，不可用于临床诊断。

产品特点

高特异性：针对沙氏住白细胞原虫保守序列设计引物，避免与其他病原体交叉反应。

高灵敏度：检测限可达数百拷贝/反应。

即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，操作便捷。

一管式检测：预混反应体系，减少污染风险。

双重用途：支持定性（阴阳性判断）和定量（拷贝数计算）检测。

规格与成分

规格：50次/盒（20μL反应体系）

主要成分：

2×qPCR预混液（含荧光染料）

沙氏住白细胞原虫特异性引物混合物

阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）

荧光PCR专用模板稀释液

阴性对照（DEPC-H₂O）

检测原理

通过实时监测PCR扩增过程中荧光信号变化，利用Ct值（阈值循环数）与标准曲线关联，实现目标DNA的定量分析。定性检测时，通过Ct阈值判断阴阳性。

操作流程

1. 样本准备

样本类型：血液、组织等常规生物样本。

DNA提取：使用兼容的核酸提取试剂盒，按标准方法提取样本DNA。

2. 标准曲线制备（定量检测适用）

将阳性对照按10倍梯度稀释（1×10⁷~1×10²拷贝/μL），用于绘制标准曲线（横轴：log浓度，纵轴：Ct值）。

3. PCR反应体系配制

每反应管加入：

10μL 2×预混液

2μL引物混合物

2μL模板DNA（样本/对照）

补足至20μL体系。

4. 扩增程序

预变性：95℃ 5分钟

扩增循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，采集荧光信号）

结果判读

定性检测：

阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈典型S型。

阴性：Ct值≥40。

可疑（35<Ct<40）：需重复检测，重复后Ct<40判为阳性。

定量检测：根据标准曲线计算样本DNA浓度。

注意事项

样本保存：-20℃保存，避免反复冻融；运输需泡沫箱加冰密封。

污染控制：阳性对照单独存放，操作分区（样本制备区、试剂配制区、扩增区）。

自备试剂：需用户提供样本DNA及DEPC水。

适用范围：仅限科研，严禁临床使用。

有效期与储存

有效期：12个月（-20℃避光保存）。

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