大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)ELISA试剂盒是用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液及其他相关生物液体

中ACP5浓度的科研工具，广泛应用于骨代谢、破骨细胞活性、骨质疏松等研究领域

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心法ELISA原理：

酶标板预先包被抗大鼠ACP5特异性抗体；

样本中的ACP5与抗体结合，再加入生物素标记的检测抗体，形成免疫复合物；

然后加入HRP标记的链霉亲和素，与生物素结合；

洗涤后加入TMB显色底物，HRP催化TMB产生颜色反应，颜色深浅与ACP5浓度正相关；

在450 nm波长下测定吸光度，通过标准曲线计算样本中ACP5的浓度。

主要参数

检测范围：常见为0.63-40 ng/mL 或 0.781-50 ng/mL（不同品牌有差异）

灵敏度：最低检测限可达0.38 ng/mL 或更低

特异性：仅针对大鼠ACP5，与其他类似物无明显交叉反应

精密度：板内、板间变异系数通常<10%

样本类型：血清、血浆、组织匀浆、细胞上清、尿液、脑脊液等

保存条件：2-8℃冷藏保存，避免反复冻融，有效期6个月至1年

操作步骤（简要）

从冷藏环境取出试剂盒，平衡至室温

设置标准品孔和样本孔，分别加入标准品和待测样本

37℃孵育1-2小时，使抗原抗体充分结合

洗涤酶标板3-5次，去除未结合物质

加入酶标检测抗体，37℃继续孵育30-60分钟

洗涤后加TMB显色，避光反应10-15分钟

加终止液，酶标仪450 nm读数，绘制标准曲线并计算浓度

注意事项

避免样本溶血和反复冻融，样本如不能立即检测建议分装-20℃保存

试剂盒仅供科研使用，不用于临床诊断

不同批号试剂不可混用，所有试剂使用前需摇匀

洗涤过程需彻底，避免交叉污染和板内干燥

显色底物TMB需避光保存，使用前配制

试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：

灵敏度高（抓得准）：

它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。

特异性强（瞄得准）：

基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。

操作简便且快速：

相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。

高通量与适用性广：

它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。

安全稳定：

不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。