尼氏单孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

尼氏单孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光PCR技术，针对尼氏单孢子虫（Haplosporidium nelsoni）基因高度保守区域设计特异性引物。通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现对目标核酸的定性和定量分析。

试剂组成

预混PCR Master Mix（含SYBR Green染料、dNTPs、耐热DNA聚合酶等）

尼氏单孢子虫特异性引物

阳性对照（标准品）

阴性对照（无核酸酶水）

其他辅助试剂（如缓冲液、DEPC-H2O等）

保存条件与有效期

保存温度：-20℃以下避光保存

有效期：12个月

使用方法

样本DNA提取

使用兼容的核酸提取试剂盒或自选方法提取纯化样本DNA。

标准曲线制备（定量检测适用）

将阳性对照梯度稀释（建议5个数量级，如10^7~10^3拷贝/μL），用于建立标准曲线。

每个稀释步骤需更换枪头，避免交叉污染。

PCR反应体系配制

按20μL/反应配制体系，包含预混Master Mix、引物、模板DNA及对照。

荧光定量PCR程序

预变性：95℃ 5分钟

扩增循环：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40个循环

熔解曲线分析：60℃~95℃，逐步升温（验证扩增特异性）

性能参数

灵敏度：可达几百拷贝/反应

特异性：与相近病原体无交叉反应

线性范围：定量检测时覆盖至少5个数量级

注意事项

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

操作需分区进行（样本制备区、PCR扩增区），避免污染。

试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融。

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