伯氏立克次氏体(柯克斯体)染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板，预混试剂包含PCR所需全部组分（染料、引物、酶等）。

高特异性：引物基于伯氏立克次氏体保守区设计，无交叉反应。

灵敏度与定量能力：检测线性范围达5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL），支持定性和定量分析。

内置对照：提供阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），用于排除假阴性。

操作便捷：PCR产物可直接上样电泳，含上样染料。

试剂盒组分

| 成分 | 规格/包装 | 保存条件 |

| PCR预混液（含染料） | 1 mL | -20℃避光 |

| 引物混合液 | 100 μL | -20℃避光 |

| 阳性对照DNA | 50 μL（10⁸拷贝/μL） | 单独存放，避免污染 |

| 核酸释放剂（试用装） | 1 mL | -20℃ |

| 超纯水 | 1 mL | 室温 |

| 使用手册 | 1份 | 随盒保存 |

储存与运输

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（有效期12个月）。

运输方式：低温避光运输，阳性对照需单独密封。

实验步骤

1. 样品DNA制备

使用核酸释放剂提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

2. 阳性对照稀释（梯度制备）

按10倍梯度稀释阳性对照（10²~10⁷拷贝/μL），每步更换枪头，避免污染。

3. PCR反应体系（20μL）

模板DNA：2 μL

PCR预混液：10 μL

引物混合液：1 μL

超纯水：补至20 μL

4. 扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |

| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 |

| 退火/延伸 | 60℃ | 30 sec | |

| 荧光采集 | 60℃ | 30 sec | |

5. 结果分析

定量：通过标准曲线计算拷贝数。

定性：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。

注意事项

实验分区操作，避免交叉污染。

阳性对照需最后加入，并单独存放。

试剂解冻后需彻底混匀，短暂离心后使用。

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