草鱼呼肠孤病毒3型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量RT-PCR技术，专用于快速、灵敏、特异地检测草鱼呼肠孤病毒3型（Grass Carp Reovirus Type 3, GCRV-3）的RNA。适用于科研、水产病害监测及检疫等领域，可实现对病毒RNA的定性或定量分析。

产品组成

反应预混液：含逆转录酶、DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及荧光染料（如SYBR Green）。

引物混合液：针对GCRV-3高度保守区域设计的特异性引物。

阳性对照：已知浓度的GCRV-3 RNA片段，用于标准曲线建立及实验质控。

阴性对照：无核酸酶水，用于排除污染干扰。

说明书：包含操作流程及数据分析方法。

规格：50次/盒（20μL反应体系）。

技术特点

高灵敏度：可检测低至10拷贝/μL的病毒RNA。

特异性强：引物经优化设计，不与草鱼其他病原体（如GCRV-1/2型或其他鱼类病毒）发生交叉反应。

操作简便：即开即用，仅需提供样品RNA模板。

双重质控：提供阳性和阴性对照，确保结果可靠性。

兼容性广：适用于多种RNA提取方法（如TRIzol法或商业化提取试剂盒）。

实验流程

RNA提取：

使用推荐方法提取样本RNA，建议用DNase处理以去除基因组DNA污染。

反应体系配制（冰上操作）：

按20μL体系混合预混液、引物、模板RNA及无核酸酶水。

荧光定量PCR程序：

逆转录（50℃, 15分钟）→ 预变性（95℃, 2分钟）→ 40个循环（95℃ 15秒, 60℃ 30秒，荧光采集）。

数据分析：

通过Ct值及标准曲线计算病毒RNA拷贝数，阈值设定建议为基线荧光信号的10倍标准差。

注意事项

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（运输需低温）。

适用范围：仅限科研用途，不可用于临床诊断。

污染防控：实验分区操作（样本制备区、PCR反应区），使用无核酸酶耗材。

结果判读：若阳性对照无扩增或阴性对照出现扩增曲线，需重新检测。

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