链霉菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专为链霉菌（Streptomyces spp.）的快速、高特异性检测设计，适用于科研用途。试剂盒包含优化的预混反应体系，可实现DNA模板的定性或定量分析，并配备阳性和阴性质控品以确保实验可靠性。

产品组成

链霉菌扩增预混液：含Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及荧光染料（如SYBR Green）。

链霉菌特异性引物：针对链霉菌保守基因区域设计。

阳性质控品：含链霉菌靶序列的重组质粒或基因组DNA。

阴性质控品：无DNA模板的灭菌超纯水。

使用说明书（当前文档）。

操作步骤

1. 样本处理

DNA提取：使用商业DNA提取试剂盒或酚-氯仿法从土壤、发酵液等样本中提取基因组DNA。

浓度测定：建议DNA纯度（A260/A280）为1.8~2.0，浓度≥10 ng/μL。

2. 试剂配制（在无菌环境下操作）

将预混液、引物及模板DNA解冻后涡旋混匀，短暂离心。

按20 μL体系配制反应液（示例）：

预混液：10 μL

正向/反向引物：各0.5 μL

模板DNA：2 μL

超纯水：补至20 μL

3. PCR扩增

按以下程序设置扩增条件（需根据仪器型号调整）：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40 cycles）：95℃ 30秒 → 60℃ 30秒（荧光采集） → 72℃ 30秒

熔解曲线分析：65℃~95℃，每0.5℃递增5秒

4. 结果分析

定性检测：通过熔解曲线峰形及Ct值判断样本阳性（Ct≤35）或阴性（无扩增曲线）。

定量检测：以阳性质控品梯度稀释的标准曲线计算样本初始DNA浓度。

注意事项

防污染措施：分设样本处理区、试剂配制区和扩增区，使用一次性耗材及紫外线消毒台面。

试剂保存：未开封试剂盒-20℃避光保存，避免反复冻融；解冻后预混液需避光。

质控要求：每批次实验需包含阴性质控（排除污染）和阳性质控（验证反应效率）。

适用范围：本试剂盒仅限科研使用，不适用于临床诊断。

技术参数

检测限：≤10 copies/μL（依赖样本类型）。

特异性：不与常见非链霉菌微生物DNA交叉反应。

规格：50次/盒（20 μL反应体系）。

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