弯曲杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

弯曲杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒用于体外定性检测临床样本(如粪便、食品样本等)中的弯曲杆菌(Campylobacter spp.)核酸，适用于临床辅助诊断、食品安全检测等领域。

检验原理

本试剂盒采用TaqMan荧光探针技术，针对弯曲杆菌特异性基因序列设计引物和探针。PCR扩增过程中，Taq酶5'→3'外切酶活性将探针水解，使报告基团与淬灭基团分离产生荧光信号，通过实时监测荧光信号变化实现对靶基因的定量检测。

主要组成成分

PCR反应液(含dNTPs、Mg²⁺、缓冲液等)

热启动Taq DNA聚合酶

弯曲杆菌特异性引物探针混合液

阳性对照(弯曲杆菌DNA)

阴性对照(无核酸酶水)

ROX参比染料(部分机型需要)

储存条件及有效期

-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期12个月。

适用仪器

ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler 480等常见实时荧光定量PCR仪。

样本要求

粪便样本：取新鲜粪便约1g，加入适量PBS缓冲液混匀后离心取上清

食品样本：25g样品加入225mL缓冲蛋白胨水均质后增菌培养

DNA提取建议使用商品化核酸提取试剂盒

检验方法

反应体系配制(20μL)：

PCR反应液 10μL

酶混合液 2μL

引物探针混合液 3μL

模板DNA 5μL

PCR反应程序：

预变性：95℃ 5min

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 1min，45个循环

结果判读

Ct值≤35且扩增曲线呈S型：阳性

Ct值>35或无扩增曲线：阴性

阳性对照Ct值应在20-30之间，阴性对照无扩增

性能指标

灵敏度：≤100拷贝/反应

特异性：不与沙门氏菌、志贺氏菌、大肠杆菌等常见肠道菌交叉反应

重复性：CV≤5%

注意事项

本试剂仅用于体外诊断

实验分区操作，避免污染

废弃物需按生物危险品处理

不同批次试剂组分不可混用

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