皱纹毛圆线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品基本信息

规格：50次反应（50T）

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输条件：低温避光运输，支持快递配送。

有效期：12个月（生产日期见包装标签）。

用途：科研用途，用于皱纹毛圆线虫的特异性核酸检测。

试剂盒组成

（以50次反应为例）

PCR预混液（含SYBR Green荧光染料、dNTPs、热启动DNA聚合酶）

皱纹毛圆线虫特异性引物混合液（针对保守基因序列设计）

阳性质控品（含目标基因片段，1×10⁸拷贝/μL）

阴性质控品（超纯水）

使用说明书（含操作流程及数据分析方法）。

操作流程

1. 试剂准备

将预混液分装至PCR管（20μL/管），置于冰上备用。

2. 样本处理

提取待测样本DNA（建议使用核酸提取试剂盒）。

设置对照：

阴性对照：5μL阴性质控品（超纯水）。

阳性对照：5μL稀释后的阳性质控品。

3. 加样

每管加入5μL模板DNA（或对照品），总反应体积25μL。

加样顺序：阴性对照→待测样本→阳性对照，避免交叉污染。

4. PCR扩增

推荐循环参数（以ABI 7500为例）：

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |

| 变性-退火-延伸 | 95℃ | 10 sec | 35 |

| | 58℃ | 15 sec | |

| | 72℃ | 20 sec | |

| 最终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |

5. 结果分析

荧光定量法：实时监测SYBR Green信号，阈值线需高于阴性对照背景。

判定标准：

阳性：Ct值≤45，扩增曲线呈S型。

阴性：无Ct值或Ct值>45。

注意事项

实验需在生物安全柜中进行，避免气溶胶污染。

试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融（建议分装保存）。

不同PCR仪器需优化循环参数，具体参考仪器说明书。

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

公司正在出售的产品