传染性造血器官坏死病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于荧光定量RT-PCR技术，专用于传染性造血器官坏死病病毒（IHNV）的快速、高灵敏度检测。适用于科研用途，具备即开即用、高特异性和灵敏性等特点，可检测病毒RNA的微量存在。

试剂盒组成

预混液：含优化引物、探针、荧光染料及PCR反应缓冲液。

阳性对照：用于区分假阴性结果（需单独存放，避免污染）。

DNA抽提液：用于样本前处理。

使用规格：50次/盒（20μL反应体系）。

样本处理

样本采集：按常规方法采集组织、血液或其他液体样本。

样本前处理：

液体样本：取2-3 mL，13,000 rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液混匀，100℃裂解10分钟，离心后取5μL上清用于PCR。

其他样本：需提取RNA后使用。

保存与运输：

短期保存：-20℃（有效期12个月）；

运输：泡沫箱加冰密封，确保低温环境。

PCR反应步骤

反应体系：将5μL处理后的样本加入预混液，补足至20μL体系。

反应程序：

预变性：92℃ 5分钟；

扩增循环（30次）：94℃ 60秒 → 50℃ 60秒 → 72℃ 60秒；

信号采集：复性或延伸阶段（荧光通道：激发471 nm/发射530 nm）。

仪器要求：需适配荧光定量PCR仪，参数可根据设备优化。

结果判读

荧光信号：结合DNA后最大吸收峰为500 nm，发射峰530 nm；

阳性判定：Ct值低于设定阈值，且扩增曲线呈典型S型。

注意事项

避免试剂反复冻融，开封后尽快使用；

阳性对照需单独操作，防止交叉污染；

本产品仅限科研，不可用于临床诊断；

自备试剂：样本RNA模板、无核酸酶水。

技术参数

灵敏度：可检测单拷贝病毒RNA；

特异性：引物针对IHNV保守区设计，无交叉反应；

有效期：12个月（-20℃保存）。

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