刺激隐核虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于荧光定量PCR技术，专用于检测水体或生物样本中的刺激隐核虫（Cryptocaryon irritans）核酸，具有高特异性、灵敏度及定量功能。适用于水产养殖病害监测、科研实验及环境检测等领域。

检测原理

靶标基因：针对刺激隐核虫特异性基因序列设计引物与探针，扩增产物长度为560 bp（或根据引物设计调整）。

荧光信号：采用FAM荧光基团标记探针，通过实时监测扩增过程中荧光信号变化，实现定量分析。

试剂盒组成

PCR预混液：含Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及荧光染料（即开即用）。

引物与探针：优化后的特异性引物对及探针。

阳性对照：刺激隐核虫标准DNA。

阴性对照：无核酸酶水。

DNA提取试剂（可选）：适用于样本前处理。

操作步骤

1. 样本处理

提取样本DNA（推荐使用配套提取试剂盒或自动化提取仪）。

阳性/阴性对照无需提取，直接使用。

2. PCR反应体系配制（以10 μL体系为例）

| 组分 | 体积（μL） |

| PCR预混液 | 5.0 |

| 引物（10 μM） | 各0.4 |

| DNA模板 | 2.0 |

| ddH₂O | 2.2 |

3. 扩增程序（以荧光定量PCR仪为例）

| 步骤 | 温度/时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃, 30 s | 1 |

| 定量分析 | 95℃, 5 s | 40 |

| | 60℃, 30 s | |

| 熔解曲线分析 | 95℃→60℃→95℃| 1 |

4. 结果判定

阳性：出现S型扩增曲线且Ct值≤35。

阴性：无S型曲线或Ct值>40（需排除抑制物干扰）。

无效实验：阳性对照未扩增或阴性对照出现假阳性，需重复检测。

注意事项

试剂解冻后需涡旋混匀并短暂离心。

避免反复冻融，分装保存。

不同仪器需调整荧光通道（FAM）和淬灭基团设置。

实验分区操作（样本处理区、PCR准备区、扩增区），防止污染。

性能参数

检测限：≤10 copies/μL。

特异性：不与常见水生寄生虫（如小瓜虫）交叉反应。

稳定性：-20℃保存12个月有效。

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