旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

包装规格

检测次数：50次/盒

主要成分及规格：

试剂一（PCR MagicMix 3.0）：1 mL（红盖）

试剂二（超纯水）：1 mL（亮黄色）

试剂三（引物混合液）：100 μL（白盖）

试剂四（阳性对照，1×10^8 拷贝/μL）：50 μL（黄盖）

说明书：1份

检验原理

采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对旋毛虫属（Trichinella spp.）基因保守区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性及定量检测。

储存条件及有效期

储存温度：-20℃±5℃，避光保存；

运输条件：冰袋（2~8℃）；

反复冻融次数：≤7次；

有效期：12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 系列（如7500、StepOnePlus）

MX3000P/3005P

LightCycler（Roche）

Bio-Rad（CFX系列）

Eppendorf（Mastercycler ep realplex）

自备耗材与设备

无核酸酶的1.5 mL离心管、0.2 mL PCR反应管；

滤芯吸头（10 μL、200 μL、1000 μL）；

离心机、振荡混合器、移液器。

样品要求

样本类型：胃液分泌物、呕吐物或培养物（参考《临床微生物样本采集规范》）；

保存条件：

短期：-20℃；

长期：-70℃（≤6个月）；

运输：2~8℃冰袋，避免反复冻融。

操作步骤

1. 阳性对照稀释（独立操作区）

标记6管（7~2号），每管加45 μL模板稀释液；

7号管加5 μL阳性对照（1×10^8 拷贝/μL），震荡混匀，得1×10^7 拷贝/μL标准品；

依次10倍稀释至1×10^2 拷贝/μL。

2. PCR反应体系配制（样本处理区）

按比例混合试剂引物混合液及模板DNA；

分装至反应管，避免气泡。

3. 上机检测

设置扩增程序：预变性（95℃, 2 min）→循环阶段（95℃ 15 s→60℃ 30 s，40循环）；

采集荧光信号（FAM通道）。

注意事项

阳性对照需单独操作，避免污染；

不同批号试剂不可混用；

实验分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区）需严格隔离。

质量控制

阳性对照：Ct值≤30；

阴性对照：无扩增曲线；

无效结果需复检。

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