蛙病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

蛙病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光PCR技术，专用于蛙属虹彩病毒（RIV）核酸的定量与定性检测。通过特异性引物和荧光探针靶向病毒基因序列，结合荧光信号采集系统，实现高灵敏度、高特异性的病原体检测。

检测原理

探针法设计：采用FAM标记的荧光探针，在PCR扩增过程中，Taq DNA酶的5'核酸外切酶活性水解探针，释放荧光信号。

信号采集：荧光强度与目标DNA扩增量成正比，通过Ct值（阈值循环数）定量分析病毒载量。

试剂组成

| 组分 | 规格（50T/盒） |

| 反应液 | 500μL × 2管 |

| 酶液 | 50μL × 1管 |

| 阳性质控品 | 250μL × 1管 |

| 阴性质控品 | 250μL × 1管 |

注意：不同批号组分不可混用。

储存条件与有效期

储存：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤5次）。

有效期：12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 7500

安捷伦 MX3000P/3005P

LightCycler

Bio-Rad CFX系列

操作步骤

样本处理

使用磁珠法或离心柱法提取核酸，建议配套专用提取试剂。

试剂配制

按样本数（N=待测样本+阴阳对照）配制反应体系（20μL/管）：

反应液：19μL

酶液：1μL

加样与扩增

加入5μL模板DNA至反应管，短暂离心后上机。

扩增程序：

预变性：95℃ 5min

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15s → 60℃ 60s（采集荧光信号）

结果判读

定量分析：以阳性对照Ct值绘制标准曲线，计算待测样本病毒浓度。

定性分析：

阳性：Ct≤35，且扩增曲线呈指数增长。

阴性：Ct≥40。

灰区（35<Ct<40）：需复测确认。

注意事项

本产品仅限科研使用，操作需穿戴实验服、口罩及手套。

避免试剂污染，分区操作（样本处理区、试剂准备区、扩增区）。

反应液分装后避免反复冻融。

公司正在出售的产品