土拉热弗朗西斯菌染料法荧光定量PCR试剂盒

土拉热弗朗西斯菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

本试剂盒采用染料法实时荧光定量PCR技术，专用于检测土拉热弗朗西斯菌核酸，适用于科研领域的定性及定量分析，包括绝对定量、基因表达差异分析及基因分型。

检验原理

基于实时荧光定量PCR技术，通过荧光染料（如SYBR Green）与双链DNA结合释放信号，实时监测扩增进程。针对土拉热弗朗西斯菌保守基因区域设计特异性引物，确保扩增的高灵敏度和专一性，避免与其他物种交叉反应。

试剂组成

扩增液：25μL ×1管

反应液：975μL ×1管（含荧光染料、dNTPs、酶等）

阳性质控品：50μL ×1管（含土拉热弗朗西斯菌靶序列）

阴性质控品：50μL ×1管（无靶序列，用于排除污染）

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板，无需额外配制反应体系。

高特异性：引物经优化仅扩增土拉热弗朗西斯菌靶基因。

质控完善：提供阴阳性对照，辅助结果判读。

闭管操作：减少气溶胶污染风险。

兼容性广：适用于组织、细胞、血液等多种样本类型（需提前确认样本处理方案）。

技术参数

检测限：可检测低至10拷贝/μL的靶序列。

线性范围：10^1–10^8拷贝/μL（需配合标准曲线）。

反应体系：20μL/次，足够50次检测。

适用仪器：兼容主流荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX等）。

样本要求

样本类型：DNA提取物（推荐浓度≥10 ng/μL，A260/A280为1.8–2.0）。

保存条件：短期可存于-20℃，长期建议-80℃保存；避免反复冻融。

实验步骤

反应配制：按比例混合反应液、扩增液及模板DNA。

上机检测：设置程序：预变性（95℃, 2 min）→循环扩增（95℃ 15 s, 60℃ 30 s，40循环）。

数据分析：根据Ct值及标准曲线计算样本中靶基因含量。

注意事项

实验环境：需在无核酸污染区域操作，建议使用UDG酶防污染。

质控要求：每批次实验需包含阴阳性对照。

应用限制：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

储存与运输

储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输方式：干冰或冰袋低温运输。

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