柏氏血矛线虫染料法荧光定量PCR试剂盒

柏氏血矛线虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

柏氏血矛线虫(Haemonchus placei)是一种主要寄生于牛、羊等反刍动物真胃内的线虫，可引起宿主贫血、消瘦甚至死亡。本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专为检测和定量分析样本中的柏氏血矛线虫核酸而设计，适用于科研用途。

技术原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法荧光定量PCR技术：

特异性引物针对柏氏血矛线虫基因组中的高度保守区域(如ITS区域或线粒体基因)设计

SYBR Green染料可非特异性结合所有双链DNA，在PCR扩增过程中随产物积累而荧光信号增强

仪器实时监测荧光信号变化，通过Ct值(循环阈值)判断样本中是否含有目标核酸

通过标准曲线可计算初始模板拷贝数，实现定量分析

产品规格

规格：50次反应(50T)

保存条件：-20℃避光保存

有效期：12个月

主要组分

| 组分名称 | 规格 | 主要功能 |

| 2×SYBR qPCR Mix | 500μL-1mL | 含Taq酶、dNTPs、缓冲液、Mg²⁺等 |

| PCR引物混合液 | 100μL | 特异性扩增柏氏血矛线虫目标片段 |

| 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50μL | 含目的基因片段的质粒或DNA |

| 模板稀释液 | 1mL | 用于稀释阳性对照或溶解DNA模板 |

产品特点

高灵敏度：可检测低至10³拷贝/μL的标准品

操作简便：预混液设计，减少操作步骤

稳定性好：-20℃保存12个月性能稳定

兼容性强：适用于多种荧光定量PCR仪

操作流程

样本DNA制备

使用自选方法纯化样本DNA

设置阳性对照和阴性对照

短期保存于2-8℃，长期保存于-70℃(避免反复冻融)

PCR反应体系配置(20μL体系)

2×SYBR qPCR Mix：10μL

引物混合液：2μL

模板DNA：8μL

总计：20μL

扩增程序

预变性：95℃ 5分钟

扩增循环(40个循环)：

95℃ 15秒

60℃ 30秒(采集荧光信号)

熔解曲线分析：60-95℃，每0.5℃增加，停留5秒

注意事项

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断

操作时需分区进行，避免交叉污染

建议使用无核酸酶耗材

反应体系配制应在冰上进行

熔解曲线分析可验证产物特异性

质量控制

阳性对照Ct值应≤30

阴性对照无扩增曲线

熔解曲线应为单一峰

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