肠道病毒A组染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

产品特点

即开即用：用户仅需提供病毒RNA样本，无需额外配制试剂。

高特异性：针对肠道病毒A组保守序列设计引物，无交叉反应。

高灵敏度：检测限低至数百拷贝/反应。

防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。

快速检测：2小时内完成RT-PCR扩增及结果分析。

组分清单

| 成分 | 规格 | 包装颜色 |

| 2×qPCR MagicMix | 500 μL | 棕色管 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 黄盖 |

| 肠道病毒通用引物混合物 | 100 μL | 白盖 |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL | 红盖 |

| DNA病毒裂解液（试用装） | 9 mL（15次） | — |

| 使用手册 | 1份 | — |

储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

样本要求

粪便样本：采集后立即置于无菌管中，-80℃保存或干冰运输。

血液样本：EDTA抗凝全血2 mL，避免反复冻融。

组织样本：病灶部位新鲜渗出物或黏液脓血，需匀浆处理。

操作流程

1. 样本前处理

使用配套裂解液提取核酸，具体步骤参见手册附录。

2. 阳性对照稀释

按10倍梯度稀释阳性对照（10²~10⁷拷贝/μL），独立操作以防污染。

3. PCR反应体系

每20 μL反应体系包含：

2×qPCR MagicMix 10 μL

引物混合物 2 μL

模板RNA 2 μL

无核酸酶水补至20 μL。

4. 扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 反转录 | 50℃ | 15 min | 1 |

| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |

| 扩增 | 95℃ 15 sec → 60℃ 1 min | 40 |

结果判读

Ct值≤35：判定为阳性；

Ct值＞35或无扩增曲线：阴性（需复检）。

注意事项

实验分区操作，避免气溶胶污染。

阳性对照需与样本分时操作，使用专用移液器。

失效或异常扩增时，检查试剂储存条件及样本完整性。

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