肠道病毒B组染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

产品特点

即开即用：用户仅需提供病毒RNA样本，无需额外配制反应体系。

高特异性：针对肠道病毒B组保守序列设计引物，与其他病毒无交叉反应。

高灵敏度：检测限低至几百拷贝/反应。

防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。

快速检测：全程约2小时完成RNA提取至荧光定量PCR分析。

试剂盒组成

| 成分编号 | 组分名称 | 规格 | 用途 |

| A | 2×qPCR MagicMix（预混液） | 500 μL（棕色管） | 含荧光染料、dNTPs及聚合酶 |

| B | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 阳性对照稀释及样本处理 |

| C | 肠道病毒B组引物混合物 | 100 μL（白盖） | 特异性扩增目标序列 |

| D | 阳性对照（1×10^8拷贝/μL） | 50 μL（红盖） | 标准曲线制备 |

| E | DNA病毒裂解液（试用装） | 15次（9 mL） | 样本核酸提取 |

| F | 使用说明书 | 1份 | 操作指南 |

样本要求

临床样本：

粪便：采集1-2 g置于无菌管，立即送检或-80℃保存。

咽拭子：用无菌拭子采集咽喉分泌物，置于病毒保存液中。

血液：EDTA抗凝全血2 mL，避免溶血。

样本处理：建议使用配套裂解液（组分E）提取RNA，或采用等效商业试剂盒。

操作步骤

1. 阳性对照稀释（以10^2~10^7拷贝/μL为例）

在独立洁净区进行，避免污染。

按10倍梯度稀释阳性对照（组分D），依次标记为2~7号管（10^7~10^2拷贝/μL）。

2. PCR反应体系配制（20 μL/反应）

| 组分 | 体积 |

| 2×qPCR MagicMix（A） | 10 μL |

| 引物混合物（C） | 2 μL |

| 模板RNA | 2 μL |

| RNase-free水 | 6 μL |

3. 荧光定量PCR程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 反转录 | 50℃ | 15 min | 1 |

| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |

| 扩增 | 95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec | 40 |

结果分析

阈值设定：以扩增曲线指数期起始点为基线。

定量标准：根据阳性对照标准曲线计算样本病毒载量。

注意事项

实验分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区），避免气溶胶污染。

阳性对照需单独存放，严禁与待测样本交叉使用耗材。

若Ct值≥35，建议重复检测或重新采样。

公司正在出售的产品