肠道病毒D组染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

适用范围：科研用途，适用于粪便、血液、病灶分泌物等样本中肠道病毒D组核酸的定性检测。

产品特点

即开即用：预混优化试剂，用户仅需提供待测样本RNA。

高特异性：针对肠道病毒D组保守序列设计引物，与其他常见病毒无交叉反应。

高灵敏度：检测限低至100拷贝/反应。

防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。

快速检测：全程约2小时完成反转录及荧光定量PCR。

试剂盒组成

| 成分 | 规格 | 用途 |

| 2×qPCR预混液（含染料） | 500 μL | PCR扩增主反应液 |

| 肠道病毒D组引物混合物 | 100 μL | 特异性扩增目标序列 |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL | 标准曲线构建 |

| RNA提取试剂（裂解液） | 9 mL | 样本核酸提取 |

| 荧光PCR专用稀释液 | 1 mL | 阳性对照梯度稀释 |

| 使用说明书 | 1份 | 操作指南 |

样本要求

粪便样本：取0.5 g置于无菌管，立即送检或-80℃保存。

血液样本：EDTA抗凝全血2 mL，4℃保存不超过24小时。

病灶样本：采集新鲜渗出物，避免干燥。

操作步骤

RNA提取：使用配套裂解液按说明书提取样本RNA。

阳性对照稀释：将阳性对照用稀释液梯度稀释为10²~10⁷拷贝/μL（6个浓度点）。

PCR反应体系：

每20 μL反应体系含2×预混液10 μL、引物混合物2 μL、模板RNA 5 μL。

扩增程序：

50℃ 15 min（反转录）→ 95℃ 3 min → 40循环（95℃ 15 s, 60℃ 30 s）。

结果判读

阈值设定：以基线信号均值+10倍标准差为阈值。

阳性判定：Ct值≤35且扩增曲线呈S型。

注意事项

实验分区操作，避免交叉污染。

阳性对照需单独存放，严禁与待测样本混用。

本试剂仅限专业人员使用，不适用于临床诊断。

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