大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(Cys-C)ELISA试剂盒 新品

大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(Cys-C)ELISA试剂盒

产品简介:

大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂3（Cys-C）ELISA试剂盒是专为定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中Cys-C含量设计的科研产品，基于双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），具备高灵敏度、高特异性和良好的重复性。检测原理为：预包被抗大鼠Cys-C抗体的微孔板与样本中的Cys-C结合，再加入HRP标记的检测抗体，形成免疫复合物，通过洗涤去除未结合物质，加入显色剂TMB后，在450nm波长下测定吸光度，根据标准曲线计算样本中Cys-C的浓度。

主要特点

检测范围：0.156-10ng/mL（不同品牌/批次可能略有差异）。

灵敏度：可达0.10ng/mL，满足高灵敏检测需求。

特异性：与其它细胞因子无交叉反应，可准确检测目标蛋白。

重复性：板内、板间变异系数均小于10%，结果稳定可靠。

适用样本：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清、尿液等多种生物液体。

应用领域

用于大鼠肾脏功能相关研究，如肾小球滤过率评估、肾损伤早期诊断、糖尿病肾病、高血压肾损害等；也可用于其他涉及Cys-C表达变化的疾病机制及药物研发基础实验。

操作简要流程

样本准备：血清、血浆等样本适当处理后备用。

试剂平衡：试剂盒组分恢复至室温（20-25℃）。

加样：标准品和待测样本分别加入微孔板，每孔50μL，设空白对照。

温育：37℃孵育30-60分钟。

洗板：弃去液体，洗涤5次，拍干。

加酶标抗体：每孔加入50μL，37℃孵育30分钟。

洗板：同上。

显色与终止：每孔加入显色剂A、B各50μL，37℃避光显色10-15min；加终止液50μ。

读数：450nm测定OD值，依据标准曲线计算浓度。

注意事项

避免样本反复冻融，会影响酶活性，应避免使用含的样本。

浓缩洗涤液稀释时可用蒸馏水，结晶析出时温水助溶。

严格遵守操作说明，确保结果准确

如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

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试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。