伊塔图巴病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

伊塔图巴病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品特点

即开即用：预混优化试剂，用户仅需提供病毒RNA模板。

高特异性：针对伊塔图巴病毒保守序列设计引物，无交叉反应。

高灵敏度：检测下限达100-500拷贝/反应。

防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。

宽线性范围：定量检测时线性范围覆盖5个数量级。

试剂盒组成

| 成分 | 规格（50T） | 备注 |

| 2×qPCR MagicMix | 500μL（棕色管） | 含荧光染料、dNTPs、酶 |

| 荧光PCR专用稀释液 | 1mL | 模板稀释用 |

| 阳性对照 | 50μL | 含靶标片段 |

| 阴性对照 | 50μL | DEPC水 |

操作步骤

RNA提取：

使用商业RNA提取试剂盒从样本（如血清、组织）中提取病毒RNA。

测定RNA浓度并调整至50-100ng/μL。

反应体系配制（20μL/反应）：

2×qPCR MagicMix     10μL  

引物混合液（F/R）   各1μL  

RNA模板             2μL  

稀释液              补至20μL  

PCR程序设置（以ABI仪器为例）：

逆转录：50℃ 15分钟（可选，若含逆转录酶）。

预变性：95℃ 3分钟。

扩增循环（40次）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）。

数据分析：

使用仪器配套软件分析Ct值，通过标准曲线定量。

注意事项

运输：低温干冰运输，避免反复冻融。

质量控制：每批次实验需包含阴阳性对照。

仪器兼容性：适用于ABI、Bio-Rad、LightCycler等主流荧光定量PCR仪。

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