大鼠白介素12(IL-12)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

大鼠白介素12（IL-12）ELISA试剂盒是专为定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中IL-12含量设计的科研产品，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），具备高灵敏度、高特异性和良好的重复性。

核心原理

预先包被抗大鼠IL-12抗体的微孔板，样本中的IL-12与抗体结合，再加入HRP标记的检测抗体，形成免疫复合物。

洗涤后加入显色底物TMB，颜色深浅与IL-12浓度成正相关。

450nm波长下测定OD值，通过标准曲线计算样品中IL-12浓度。

主要特点

检测范围宽：通常为15.625-1000pg/ml，灵敏度可达9.375pg/ml（不同品牌/批次略有差异）。

高特异性：与其它细胞因子无交叉反应，准确检测目标蛋白。

重复性好：板内、板间变异系数均小于10%，结果稳定可靠。

应用广泛：适用于大鼠IL-12在免疫、炎症、肿瘤、神经科学等基础研究领域的表达水平检测。

操作流程简要

样本准备：血清、血浆、组织匀浆、细胞上清等适当处理并稀释。

加样：标准品和样本分别加入微孔板，设空白对照。

温育：37℃孵育30-60分钟。

洗板：弃去液体，洗涤5次。

加检测抗体：生物素化抗IL-12抗体，37℃孵育30分钟。

加酶结合物：HRP标记链霉亲和素，37℃孵育30分钟。

显色与终止：TMB显色，加终止液。

读数：450nm测定OD值，依据标准曲线计算浓度。

注意事项

避免样本反复冻融，不可检测含的样品。

试剂盒组分需按说明书规范使用和保存。

严格遵守操作步骤及仪器校准，确保结果准确

试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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ELISA试剂盒的主要优点

ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：

灵敏度高（抓得准）：

它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。

特异性强（瞄得准）：

基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。

操作简便且快速：

相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。

高通量与适用性广：

它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。

安全稳定：

不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。