大鼠CXC趋化因子配体12(CXCL12)elisa试剂盒 新品

大鼠CXC趋化因子配体12(CXCL12)elisa试剂盒

产品简介:

大鼠CXC趋化因子配体12(CXCL12) ELISA试剂盒是专为定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中CXCL12含量设计的科研产品，采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），具备高灵敏度和高特异性。

核心原理

微孔板预先包被抗大鼠CXCL12特异性抗体，样本中的CXCL12与抗体结合后，加入生物素标记的检测抗体，再与HRP标记链霉亲和素形成免疫复合物。

洗涤后加入TMB显色底物，颜色深浅与CXCL12浓度成正相关。

450nm波长下测定OD值，通过标准曲线计算样品中CXCL12浓度。

主要特点

检测范围宽：可检测15.6–1000 pg/mL，灵敏度可达1–10 pg/mL（不同品牌/批次有差异）。

高特异性：与人和鼠的IP-10/CRG-2等均无交叉反应，准确检测目标蛋白。

重复性好：板内、板间变异系数均小于10%，数据稳定可靠。

应用领域广：适用于免疫学、炎症、肿瘤转移、干细胞归巢等基础研究领域。

操作流程简要

样本准备：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝）、组织匀浆（加生理盐水捣碎）、细胞上清等，避免反复冻融。

加样：分别加入标准品和待测样本，设空白对照孔。

温育：37℃孵育1–2小时。

洗板：弃去液体，洗涤3–5次。

加检测抗体：生物素化抗体，37℃孵育30–60分钟。

洗板：同上。

显色与终止：加入TMB，避光反应15–20分钟，再加入终止液。

读数：450nm测定OD值，依据标准曲线计算浓度。

注意事项

样本收集后如不立即检测，请分装保存于-20℃，避免反复冻融。

试剂盒组分需按说明书规范使用和保存，严格控制反应时间和温度。

严格遵守操作步骤及仪器校准，确保结果准确。

如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

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试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。