大鼠AXL受体酪氨酸激酶(AXL)ELISA试剂盒 新品

大鼠AXL受体酪氨酸激酶(AXL)ELISA试剂盒

产品简介:

检测目标

特异性定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清或组织匀浆中的 AXL受体酪氨酸激酶（一种与细胞增殖、迁移、免疫调节和肿瘤进展相关的关键蛋白）。

检测原理

双抗体夹心ELISA法：

预包被抗大鼠AXL抗体捕获样本中的AXL；

生物素标记的二抗与AXL结合；

HRP-链霉亲和素系统催化TMB显色，OD值（450nm）与AXL浓度正相关。

二、核心组分与规格（以主流品牌为例）

组分  说明

预包被96孔微孔板  抗大鼠AXL单克隆/多克隆抗体

重组大鼠AXL标准品  浓度梯度（通常0-1000 pg/mL）

生物素化检测抗体  高特异性，避免交叉反应

HRP-链霉亲和素浓缩液  信号放大系统

TMB显色底物 & 终止液  终止后黄色，450nm读数

样本稀释液 & 洗涤液  优化缓冲体系，减少非特异性结合

三、技术特点与优势

高灵敏度

最低检测限可达 5-10 pg/mL，适合低丰度AXL检测（如早期肿瘤或炎症模型）。

高特异性

经交叉实验验证，不与大鼠Tyro3、MerTK等其他TAM家族受体交叉反应。

宽动态范围

标准曲线范围通常为 31.2-2000 pg/mL，覆盖生理和病理浓度。

重复性好

板内和板间变异系数（CV）＜10%，数据可靠性高。

四、典型应用场景

肿瘤研究

AXL在肿瘤转移、耐药性（如肺癌、乳腺癌）中的作用机制分析。

免疫与炎症

脓毒症、自身免疫性疾病中AXL对巨噬细胞极化的调控。

药物开发

AXL抑制剂或靶向疗法的药效评价（如Bemcentinib类似物）。

五、操作关键注意事项

样本处理

血清/血浆：建议使用肝素抗凝，避免反复冻融（≤3次）；

组织样本：需加入蛋白酶抑制剂，匀浆后离心（10,000×g, 10min）取上清。

标准曲线拟合

推荐使用四参数逻辑（4-PL）曲线拟合，尤其适用于宽浓度范围。

干扰因素控制

高脂血症样本可能干扰检测，需稀释后复测。

七、常见问题与解决方案

背景值高：延长洗涤时间（建议每孔300μL洗涤液，洗5次）。

标准曲线异常：检查标准品稀释是否准确，避免孔间污染。

样本浓度超出范围：稀释后复测，确保落在标准曲线线性区间内。

如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

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试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。