小鼠组织纤维蛋白溶酶原激活剂(tPA)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

检测原理

双抗体夹心法：酶标板包被抗小鼠tPA抗体，加入样本或标准品后，tPA与包被抗体结合。随后加入生物素标记的抗tPA抗体，形成复合物。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，催化底物显色，颜色深浅与tPA浓度正相关，通过酶标仪测定OD值，计算样本浓度。

主要参数

灵敏度：23.44 pg/mL。

检测范围：39.06-2500 pg/mL。

特异性：特异性识别小鼠tPA，与其他类似物无交叉反应。

精密度：批内变异系数（CV）<10%，批间CV<15%。

试剂盒组成

预包被抗体的96孔板、标准品、生物素化抗体、HRP标记亲和素、洗涤液、底物液、终止液等。

适用样本

血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆液等。

操作步骤

加样：加入标准品或样本，37℃孵育。

洗涤：去除未结合物质。

加抗体：加入生物素化抗体，孵育后洗涤。

加酶结合物：加入HRP标记亲和素，孵育后洗涤。

显色：加入底物液显色，终止反应后测定OD值。

保存条件

储存温度：2-8℃。

有效期：6个月。

注意事项

样本处理：避免溶血和高血脂样本，及时检测或分装冻存。

试剂平衡：试剂盒取出后需室温平衡30分钟。

洗涤彻底：手工或自动洗板需彻底，避免残留影响结果。

避免污染：使用一次性吸头，避免交叉污染。

应用领域

科研研究：用于血栓形成、溶栓治疗、血管疾病等领域的研究。

疾病机制：探索tPA在疾病发生发展中的作用。

试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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ELISA试剂盒的主要优点

ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：

灵敏度高（抓得准）：

它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。

特异性强（瞄得准）：

基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。

操作简便且快速：

相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。

高通量与适用性广：

它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。

安全稳定：

不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。