小鼠脂质运载蛋白2(NGAL)ELISA试剂盒 新品

主要特点：

高灵敏度：最小检测量可达7.9pg/ml，部分试剂盒灵敏度为0.02ng/ml或10pg/ml。

特异性强：与人、大鼠的Lipocalin-2等无交叉反应，确保检测准确性。

重复性好：板内、板间变异系数均小于10%。

适用样本广泛：可用于血清、血浆、细胞培养上清液、尿液等多种样本类型。

检测原理：

采用双抗体夹心ELISA法（Sandwich ELISA），通过预包被的单克隆捕获抗体结合样本中的NGAL，再加入生物素化的检测抗体和HRP标记的链霉亲和素，形成免疫复合物。最后加入显色剂TMB，在酶标仪450nm波长下测定吸光度，通过标准曲线计算NGAL浓度。

典型组成：

酶标包被板

标准品

酶标试剂

洗涤液

显色剂A、B液

终止液

封板膜

说明书

操作步骤：

准备试剂、样品和标准品。

加入样品和标准品，37℃反应30分钟。

洗涤后加入酶标试剂，37℃反应30分钟。

洗涤后加入显色液，37℃显色10分钟。

加入终止液，15分钟内读取OD值。

通过标准曲线计算样品中NGAL的浓度。

保存条件：

标准品：4℃保存1-2周，-20℃保存6个月。

其他组分：4℃保存6个月内有效，严禁冻存。

注意事项：

每次检测需做标准曲线，建议设置复孔。

避免不同批次试剂盒组分混用。

温度控制在25-28℃，确保检测结果准确。

应用领域：

肾脏损伤标志物检测。

炎症、代谢性疾病研究。

肿瘤微环境分析。

试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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ELISA试剂盒的主要优点

ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：

灵敏度高（抓得准）：

它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。

特异性强（瞄得准）：

基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。

操作简便且快速：

相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。

高通量与适用性广：

它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。

安全稳定：

不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。