小鼠乙型肝炎E抗原(HBeAg)ELISA试剂盒

产品介绍：

小鼠乙型肝炎E抗原（HBeAg）ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆或其他体液样本中HBeAg含量的科研工具，广泛应用于乙型肝炎病毒（HBV）感染机制研究、疫苗效力评估及抗病毒药物筛选等领域。该试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）原理，具有高灵敏度、高特异性和操作简便等优点。

主要特点

检测原理：采用双抗体夹心法，以抗HBeAg捕获抗体包被微孔板，加入样本后，HBeAg与酶标检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，加入TMB底物显色，颜色深浅与HBeAg浓度呈正相关。

检测范围：通常为2.5 IU/L至80 IU/L，可满足不同浓度样本的检测需求。

灵敏度：最低检测限可达0.1 IU/L，能够准确反映低浓度HBeAg水平。

样本类型：适用于血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液等多种样本类型。

保存条件：2-8℃保存，有效期一般为6个月。

操作步骤简述

准备试剂与样本：平衡试剂至室温，准备标准品和待测样本。

加样：在酶标板中加入标准品或样本，每孔50μL。

加入酶标抗体：每孔加入HRP标记的检测抗体，37℃温育60分钟。

洗涤：弃去液体，用洗涤液洗板5次，拍干。

显色：每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光显色15分钟。

终止反应：每孔加入50μL终止液，立即测定。

读数与计算：在450nm波长下测定OD值，通过标准曲线计算样本中HBeAg浓度。

注意事项

试剂盒仅用于科研用途，不适用于临床诊断。

实验过程中需避免交叉污染，确保结果准确性。

样本应避免溶血和反复冻融，以防止HBeAg降解或失活。

试剂与样本准备阶段：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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