小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒

产品介绍：

小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4（IGFBP-4）ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液及其他生物液体样本中IGFBP-4浓度的高灵敏度科研工具。该试剂盒基于双抗体夹心法（Sandwich ELISA）原理，具有高特异性和良好的重复性，能够准确反映样本中IGFBP-4的水平，广泛应用于生长发育、代谢调节、肿瘤发生等领域的机制研究和药物开发。

主要特点

检测原理：预包被抗小鼠IGFBP-4抗体，加入样本后，IGFBP-4与抗体结合，再加入酶标抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物，经洗涤后加入底物显色，颜色深浅与IGFBP-4浓度成正相关，450nm测定OD值，通过标准曲线计算浓度。

检测范围：通常为15.625-1000 pg/mL（不同品牌有所差异），灵敏度高，可满足多种科研需求。

样本类型：血清、血浆、组织匀浆、细胞上清、尿液等多种生物液体。

试剂盒组成：酶标包被板、标准品、检测抗体、显色剂、终止液、洗涤液等，完整且方便操作。

保存条件：2-8℃冷藏保存，避免反复冻融，有效期约6个月。

标准操作流程（简要）

准备：所有试剂平衡至室温，洗涤液稀释备用。

加样：设标准品孔和样本孔，分别加入标准品或待测样本。

孵育：37℃孵育60分钟，洗涤5次。

加酶标抗体：每孔加入HRP标记的检测抗体，37℃孵育30-60分钟，洗涤5次。

显色：加入显色剂A和B，37℃避光显色15-20分钟。

终止与测定：加入终止液，15分钟内450nm测定OD值。

数据分析：绘制标准曲线，计算样本浓度，必要时乘以稀释倍数。

注意事项

严格按照说明书操作，各试剂不可混用不同批号，实验过程需设置复孔以保证数据准确性。

试剂与样本准备阶段：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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