小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

检测原理

采用双抗体夹心法。将抗小鼠IGFBP-1的捕获抗体预包被在微孔板上，加入标准品或待测样本后，样本中的IGFBP-1与固相抗体结合。随后加入生物素标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，与生物素结合。最后加入显色底物TMB，颜色深浅与IGFBP-1浓度正相关，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度，计算样本中的IGFBP-1浓度。

产品组成

预包被抗体的96孔板

标准品（含已知浓度的IGFBP-1）

生物素标记的检测抗体

HRP标记的链霉亲和素

洗涤液

底物液（TMB）

终止液

样本稀释液

检测范围与灵敏度

检测范围：通常为31.2-2000pg/mL。

灵敏度：可检测低至31.2pg/mL的IGFBP-。

适用样本

血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等。

操作步骤

准备试剂和样本：平衡试剂盒至室温，制备标准品和样本。

加样：在酶标板孔中加入标准品、样本和相关试剂。

温育：37℃温育一定时间，使抗原抗体充分反应。

洗涤：洗去未结合的物质，避免干扰。

加酶标抗体：加入HRP标记的链霉亲和素，再次温育。

再次洗涤：洗去多余的酶标抗体。

显色：加入底物液，避光显色一定时间。

终止反应：加入终止液终止显色反应。

读数：使用酶标仪测定各孔吸光度，根据标准曲线计算样本中的IGFBP-1含量。

注意事项

样本处理：避免溶血、污染和反复冻融。

试剂使用：严格按照说明书操作，避免使用其他厂家的试剂替换。

洗涤步骤：充分洗涤，避免假阳性结果。

结果解读：每次实验需做标准曲线，确保结果准确。

储存条件

未开封试剂盒：按各组分标签所示保存，通常标准品和酶标记抗体需-20℃保存，其他试剂4℃保存。

开封后试剂盒：剩余试剂按标签保存，酶标板需干燥密封于-20℃。

试剂与样本准备阶段：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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