小鼠血管紧张素原(AGT)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

检测原理

采用双抗体夹心法。微孔板预包被抗小鼠AGT抗体，加入标准品和样本后，再加入HRP标记的检测抗体，形成固相抗体-AGT-HRP标记抗体复合物。加入TMB底物显色，通过酶标仪测定吸光度（OD值），OD值与样本中AGT浓度正相关。

产品特点

高灵敏度：检测限通常为0.563-0.625 ng/mL。

宽检测范围：一般为0.625-40 ng/mL。

高特异性：仅识别小鼠AGT，与其他类似物无交叉反应。

重复性好：板内和板间变异系数均小于10%。

操作简便：预包被微孔板，无需抗体包被过夜。

试剂盒组成

预包被抗体的酶标板：96孔或48孔微孔板。

标准品：不同浓度的小鼠AGT标准品。

HRP标记检测抗体：用于形成免疫复合物。

洗涤液：用于洗涤反应孔。

底物液：如TMB显色液。

终止液：如硫酸，用于终止显色反应。

其他：封板膜、说明书等。

适用样本

血清、血浆：需避免溶血，按规范处理。

细胞培养上清液：离心去除细胞碎片。

组织匀浆液：按重量体积比匀浆，离心取上清。

其他生物液体：如腹水、脑脊液等。

操作步骤

样本处理：按说明书要求处理样本，避免反复冻融。

标准品稀释：按比例稀释标准品，制备不同浓度梯度。

加样：设置空白孔、标准品孔和样本孔，加入相应试剂。

温育：封板后37℃温育一定时间。

洗涤：彻底洗涤反应孔，去除未结合的物质。

显色：加入底物液，避光显色。

终止：加入终止液，终止显色反应。

测定：用酶标仪在450nm波长下测定OD值，计算样本中AGT的浓度。

注意事项

试剂保存：未开封试剂盒于2-8℃保存，有效期6个月。

避免污染：更换枪头，避免重复使用吸头和试管。

洗涤充分：确保洗涤彻底，避免背景干扰。

显色液保存：TMB溶液避免接触氧化剂和金属。

试剂与样本准备阶段：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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